{"id":91561,"date":"2009-06-02T00:00:00","date_gmt":"2009-06-02T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/analisis-del-perfil-de-expresion-genica-en-respuesta-a-la-quimioterapia-y-su-relacion-con-el-estres-oxidativo-en-el-cancer-de-mama\/"},"modified":"2009-06-02T00:00:00","modified_gmt":"2009-06-02T00:00:00","slug":"analisis-del-perfil-de-expresion-genica-en-respuesta-a-la-quimioterapia-y-su-relacion-con-el-estres-oxidativo-en-el-cancer-de-mama","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica-molecular\/analisis-del-perfil-de-expresion-genica-en-respuesta-a-la-quimioterapia-y-su-relacion-con-el-estres-oxidativo-en-el-cancer-de-mama\/","title":{"rendered":"An\u00e1lisis del perfil de expresi\u00f3n g\u00e9nica en respuesta a la quimioterapia y su relaci\u00f3n con el estr\u00e9s oxidativo en el c\u00e1ncer de mama"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Laura Vera Ram\u00edrez <\/strong><\/h2>\n<p>Introducci\u00f3n. El c\u00e1ncer de mama es la neoplasia m\u00e1s frecuente y la primera causa de muerte por c\u00e1ncer entre las mujeres de todo el mundo. Las tasas de incidencia de esta enfermedad muestran una marcada variabilidad geogr\u00e1fica, siendo m\u00e1xima en pa\u00edses industrializados, lo que sugiere que el estilo de vida es un factor de riesgo de elevada influencia. Adem\u00e1s de los factores de riesgo ambientales, factores de riesgo end\u00f3genos, como la edad, la raza, la historia ginecol\u00f3gica, la historia familiar o el patr\u00f3n mamogr\u00e1fico, determinan individualmente el riesgo de desarrollar una neoplasia mamaria. el c\u00e1ncer es el resultado de la proliferaci\u00f3n no controlada de un grupo de c\u00e9lulas que, posteriormente y como estrategia de supervivencia, adquieren cierta capacidad invasiva que les permite migrar y colonizar otros tejidos y \u00f3rganos. El origen de estos eventos proliferativos es conocido como oncog\u00e9nesis y se divide en tres etapas principales denominadas iniciaci\u00f3n, promoci\u00f3n y progresi\u00f3n. A lo largo de estas tres etapas se producen una serie de aberraciones cromos\u00f3micas y alteraciones g\u00e9nicas, que dan lugar a una lesi\u00f3n en el tejido mamario que crece exponencialmente con respecto al tiempo hasta alcanzar un volumen tal, que la tasa de crecimiento es estabilizada. El mecanismo biol\u00f3gico que origina el enlentecimiento en el crecimiento del tumor, se basa en la incapacidad de la vascularizaci\u00f3n pre-existente para satisfacer la demanda de ox\u00edgeno y nutrientes de las c\u00e9lulas neopl\u00e1sicas en intensivo crecimiento. Consecuentemente, el microambiente tumoral se caracteriza por un marcado estr\u00e9s oxidativo, fruto de la hipoxia y la elevada tasa de crecimiento celular, que contribuye a la transformaci\u00f3n y evoluci\u00f3n de la enfermedad. Adem\u00e1s, es necesario se\u00f1alar que existen fuentes ex\u00f3genas de radicales libres, entre las que destaca el tratamiento con citost\u00e1ticos, que podr\u00edan influir en la progresi\u00f3n de la enfermedad y el resultado cl\u00ednico de la paciente en tratamiento. el estr\u00e9s oxidativo define una situaci\u00f3n fisiol\u00f3gica producto del desequilibrio entre la actividad de los sistemas de defensa antioxidante y producci\u00f3n de radicales libres, a favor de estos \u00faltimos. Por su avidez para aceptar electrones de otras mol\u00e9culas, los radicales libres pueden modificar la estructura y\/o la funci\u00f3n de \u00e9stas, actuando sobre componentes estructurales como la membrana plasm\u00e1tica y sobre procesos cr\u00edticos intracelulares, entre los que se incluyen la maquinaria gen\u00e9tica y diversos procesos enzim\u00e1ticos. De este modo, los radicales libres intervienen durante todo el proceso oncog\u00e9nico e igualmente favorecen la dispersi\u00f3n y migraci\u00f3n celular, pues modifican la expresi\u00f3n y\/o actividad de genes que codifican prote\u00ednas implicadas en el crecimiento tumoral, la angiog\u00e9nesis y la met\u00e1stasis.  tras la publicaci\u00f3n de los resultados del proyecto genoma humano, hemos asistido a una verdadera revoluci\u00f3n tecnol\u00f3gica que ha permitido el desarrollo de herramientas de an\u00e1lisis de alto rendimiento como los microarrays de adnc, microarrays de oligonucle\u00f3tidos y la rt-pcr m\u00faltiple. Estas tecnolog\u00edas han sido aplicadas en los \u00faltimos a\u00f1os al estudio del c\u00e1ncer de mama, dando lugar a trabajos que originaron una taxonom\u00eda molecular de las neoplasias mamarias con implicaciones terap\u00e9uticas y a la identificaci\u00f3n de un grupo selecto de genes o firma gen\u00f3mica, con capacidad para predecir la respuesta al tratamiento sist\u00e9mico del c\u00e1ncer de mama o el pron\u00f3stico de la enfermedad. El empleo de estas tecnolog\u00edas es adecuado para la identificaci\u00f3n de nuevas dianas terap\u00e9uticas, especialmente \u00fatiles en aquellos casos de pobre pron\u00f3stico y en los que una respuesta satisfactoria al tratamiento es improbable.  objetivos. El objetivo general de este trabajo fue identificar aquellos genes cuya expresi\u00f3n es modulada por el tratamiento con quimioterapia y su relaci\u00f3n con el estr\u00e9s oxidativo, para investigar los mecanismos moleculares de respuesta a f\u00e1rmacos antineopl\u00e1sicos, las principales rutas de transducci\u00f3n de se\u00f1ales intracelulares implicadas en los mismos y como se encuentran influenciados por el aumento en la concentraci\u00f3n de radicales libres.   material y m\u00e9todos. El dise\u00f1o experimental de este estudio comprende un total de 93 pacientes distribuidas en tres grupos experimentales definidos por la secuencia en que se administr\u00f3 el tratamiento: neoadyuvancia (neo) (33 pacientes), adyuvancia (ady) (30 pacientes) y met\u00e1stasis (met) (30 pacientes). Se analizadon marcadores de da\u00f1o oxidativo, defensa antioxidante y la actividad de enzimas reparadoras del adn, datos cl\u00ednicos, y marcadores bioqu\u00edmicos en los tres grupos. El an\u00e1lisis gen\u00f3mico y la caracterizaci\u00f3n anatomopatol\u00f3gica de las muestras de tejido fue llevado a cabo en el grupo n exclusivamente. Todos los an\u00e1lisis fueron llevados a cabo en muestras pareadas, es decir, de una misma paciente se extrajeron una muestra previas y otra posterior al tratamiento con quimioterapia. para la evaluaci\u00f3n del da\u00f1o oxidativo en adn se emple\u00f3 el ensayo comet alcalino en linfocitos de sangre perif\u00e9rica, para la evaluaci\u00f3n del da\u00f1o en prote\u00ednas se analiz\u00f3 el contenido de prote\u00ednas carbonilo en plasma y para la del da\u00f1o en l\u00edpidos se llev\u00f3 a cabo la cuantificaci\u00f3n de tbars en muestras de plasma. Por otra parte se determin\u00f3 la capacidad antioxidante total del plasma mediante el ensayo con el radical abts\u00c2\u00bf+, la actividad de enzimas reparadoras del adn y se extrajeron y cuantificaron una serie de antioxidantes liposolubles (retinol, tocoferol y coenzima q). Para el tratamiento estad\u00edstico de los datos obtenidos del estudio del balance oxidativo y el an\u00e1lisis de la informaci\u00f3n cl\u00ednica, se aplicaron tests estad\u00edsticos param\u00e9tricos y no param\u00e9tricos en funci\u00f3n de la homogeneidad de la varianza y la normalidad de las variables. las muestras de tejido empleadas para el an\u00e1lisis gen\u00f3mico fueron seleccionadas en funci\u00f3n del contenido de c\u00e9lulas tumorales y par\u00e1metros morfol\u00f3gicos. Posteriormente se extrajo el arn del tejido, cuya concentraci\u00f3n y pureza fueron medidas de forma previa a la s\u00edntesis de adnc. A partir del adnc se sintetiz\u00f3 el arnc biotinilado, que fue fragmentado para preparar las mezclas de hibridaci\u00f3n que se aplicaron sobre los chips. Por \u00faltimo se procedi\u00f3 al lavado, tinci\u00f3n y escaneado de los chips. El procesamiento bionform\u00e1tico de los datos analiz\u00f3 los controles de calidad necesarios para estimar la validez de los resultados, llev\u00f3 a cabo un proceso de normalizaci\u00f3n para eliminar la variabilidad de los datos y aplic\u00f3 una serie de test estad\u00edsticos y herramientas bioinform\u00e1ticas, como el an\u00e1lisis de pca y cl\u00faster jer\u00e1rquico, para la obtenci\u00f3n de diferencias de expresi\u00f3n g\u00e9nica entre las muestras. Para finalizar, se llevo a cabo el an\u00e1lisis funcional de los genes seleccionados mediante el empleo de los programas panther y david.  resultados y discusi\u00f3n. En general, los resultados del an\u00e1lisis de marcadores de da\u00f1o oxidativo mostraron que las pacientes del grupo de neoadyuvancia fueron aquellas que registraron un aumento significativo del da\u00f1o oxidativo tras la quimioterapia, mientras los grupos de adyuvancia y met\u00e1stasis mantuvieron niveles de da\u00f1o elevados pero estables tras el tratamiento. Estos resultados sugieren que, en nuestras condiciones experimentales, la cirug\u00eda e intervenciones cl\u00ednicas previas generan cierto estr\u00e9s oxidativo al que se suma el provocado por la administraci\u00f3n de quimioter\u00e1picos, hasta alcanzar un nivel a partir del cual, subsiguientes intervenciones cl\u00ednicas no generan ning\u00fan aumento del da\u00f1o oxidativo. La activaci\u00f3n de los mecanismos de reparaci\u00f3n del adn y defensa antioxidante en los grupos de adyuvancia y met\u00e1stasis, contribuir\u00edan a la estabilizaci\u00f3n del da\u00f1o oxidativo observada. el an\u00e1lisis de enriquecimiento funcional destac\u00f3 3 rutas moleculares moduladas por el estr\u00e9s oxidativo: respuesta al estr\u00e9s oxidativo, angiog\u00e9nesis, se\u00f1alizaci\u00f3n mediada por pdgf y metabolismo de la matriz extracelular. Los resultados de nuestro estudio mostraron que la quimioterapia reprime la expresi\u00f3n de genes que afectan notablemente a la supervivencia, la capacidad invasiva y la migraci\u00f3n de c\u00e9lulas transformadas. Gran parte de estos genes se relacionan directa o indirectamente con los factores de crecimiento pdgf y vegf, lo que confirma la conocida interrelaci\u00f3n entre la remodelaci\u00f3n de la matriz extracelular y la angiog\u00e9nesis como mecanismo promotor de la met\u00e1stasis. Sin embargo, los radicales libres generados podr\u00edan crear un ambiente altamente oxidativo que contrarrestase la quiescencia estromal inducida por la quimioterapia, pues es conocido que estimulan la actividad de los factores de crecimiento pro-angiog\u00e9nicos y otras mol\u00e9culas, que a su vez incrementan la producci\u00f3n de radicales libres, creando un bucle de regulaci\u00f3n positiva que podr\u00eda disminuir la eficacia del tratamiento antineopl\u00e1sico. por \u00faltimo, se hall\u00f3 un conjunto de genes implicados en la transducci\u00f3n de se\u00f1ales intracelulares propias de un tipo celular altamente indiferenciado y conocido como c\u00e9lulas madre del c\u00e1ncer. La represi\u00f3n de la expresi\u00f3n de genes que codifican prote\u00ednas activas en puntos alejados del inicio de las cascadas de se\u00f1alizaci\u00f3n propias de las c\u00e9lulas madre, sugieren la presencia de estas c\u00e9lulas en los tumores de nuestras pacientes e indicar\u00eda la limitada eficacia del tratamiento con citost\u00e1ticos para eliminarlas, ya que muchos de los genes descritos en este trabajo son expresados por tipos celulares caracter\u00edsticos del estroma tumoral, posiblemente tras la inducci\u00f3n de las c\u00e9lulas madre tumorales. la trascendencia cl\u00ednica de estos resultados radica en que proporcionan un mejor conocimiento de la biolog\u00eda molecular de los tumores en respuesta a la quimioterapia, lo que har\u00eda posible el desarrollo de nuevas terapias dirigidas o la mejora de las existentes. Esta intervenci\u00f3n, junto con el desarrollo de terapias que reduzcan el estr\u00e9s oxidativo por debajo del umbral que estimula la inestabilidad gen\u00f3mica de las c\u00e9lulas tumorales y la activaci\u00f3n de se\u00f1ales de crecimiento, mejorar\u00eda el resultado cl\u00ednico y limitar\u00eda la toxicidad asociada al mismo. Por otra parte, el desarrollo de f\u00e1rmacos capaces de bloquear la actividad de prote\u00ednas implicadas en las cascadas de se\u00f1alizaci\u00f3n selectivamente activadas en las c\u00e9lulas madre tumorales, suponen una prometedora alternativa terap\u00e9utica, sobre todo en el caso de carcinomas mamarios altamente indiferenciados y cl\u00ednicamente agresivos.  conclusi\u00f3n general. El an\u00e1lisis del perfil transcripcional de muestras de c\u00e1ncer de mama previas y posteriores al tratamiento con antraciclinas y taxanos, mostr\u00f3 la represi\u00f3n de la expresi\u00f3n de un grupo de genes relacionados con la respuesta al estr\u00e9s oxidativo, la remodelaci\u00f3n de la matriz extracelular y la angiog\u00e9nesis, cuya actividad es modulada positivamente por el aumento del estr\u00e9s oxidativo inherente al tumor o bien secundario a la quimioterapia. Por otra parte, la quimioterapia promueve la destrucci\u00f3n de c\u00e9lulas epiteliales, estromales y vasculares cuyo programa transcripcional podr\u00eda hallarse inducido por las c\u00e9lulas madre tumorales. Estos hallazgos podr\u00edan dirigir el desarrollo de nuevas estrategias terap\u00e9uticas o la mejora del tratamiento sist\u00e9mico existente, aumentando su efectividad y disminuyendo su morbilidad.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>An\u00e1lisis del perfil de expresi\u00f3n g\u00e9nica en respuesta a la quimioterapia y su relaci\u00f3n con el estr\u00e9s oxidativo en el c\u00e1ncer de mama<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 An\u00e1lisis del perfil de expresi\u00f3n g\u00e9nica en respuesta a la quimioterapia y su relaci\u00f3n con el estr\u00e9s oxidativo en el c\u00e1ncer de mama <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Laura Vera Ram\u00edrez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Granada<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 06\/02\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Jos\u00e9 Antonio Lorente Acosta<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Mar\u00eda del carmen Ram\u00edrez tortosa <\/li>\n<li>\u00e1lvaro Rodriguez lescure (vocal)<\/li>\n<li>c\u00e9sar Luis Ram\u00edrez tortosa (vocal)<\/li>\n<li>Juan  Carlos Rodriguez-manzaneque escribano (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Laura Vera Ram\u00edrez Introducci\u00f3n. El c\u00e1ncer de mama es la neoplasia m\u00e1s frecuente y la primera causa [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[115,15231,484,347],"tags":[47674,79505,142358,63567,189651,150365],"class_list":["post-91561","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-bioquimica-molecular","category-genetica-molecular","category-mecanismos-de-accion-de-la-quimioterapia","category-oncologia-clinica","tag-alvaro-rodriguez-lescure","tag-cesar-luis-ramirez-tortosa","tag-jose-antonio-lorente-acosta","tag-juan-carlos-rodriguez-manzaneque-escribano","tag-laura-vera-ramirez","tag-maria-del-carmen-ramirez-tortosa"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/91561","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=91561"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/91561\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=91561"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=91561"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=91561"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}