{"id":91843,"date":"2018-03-11T10:10:44","date_gmt":"2018-03-11T10:10:44","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/influencia-de-la-movilidad-de-las-helices-en-la-funcion-de-la-bacteriorodopsina\/"},"modified":"2018-03-11T10:10:44","modified_gmt":"2018-03-11T10:10:44","slug":"influencia-de-la-movilidad-de-las-helices-en-la-funcion-de-la-bacteriorodopsina","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/espectroscopia-de-infrarrojos\/influencia-de-la-movilidad-de-las-helices-en-la-funcion-de-la-bacteriorodopsina\/","title":{"rendered":"Influencia de la movilidad de las h\u00e9lices en la funci\u00f3n de la bacteriorodopsina"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Rosana Sim\u00f3n V\u00e1zquez <\/strong><\/h2>\n<p>La bacteriorodopsina (br) es una prote\u00edna transmembrana expresada por la arqueobacteria h.Salinarum. Ha sido muy estudiada debido a su similitud con la rodopsina visual y otras prote\u00ednas de la familia de las gpcrs, adem\u00e1s de formar parte de uno de los sistemas fotosint\u00e9ticos m\u00e1s sencillos que se conocen.  la bacteriorodopsina es un transportador de protones que realiza su funci\u00f3n gracias a la absorci\u00f3n de un fot\u00f3n mediante su crom\u00f3foro, el retinal, lo que proporciona la energ\u00eda necesaria para realizar el fotociclo. El resultado final es el transporte neto de un prot\u00f3n desde el lado citoplasm\u00e1tico al lado extracelular. a pesar de que su estructura y funci\u00f3n son bien conocidas todav\u00eda hay aspectos funcionales que son desconocidos o no han sido suficientemente caracterizados. en este sentido la existencia de un posible movimiento de las h\u00e9lices e, f y g en el lado citoplasm\u00e1tico durante la funci\u00f3n de la prote\u00edna, en el proceso de reprotonaci\u00f3n, ha sido ampliamente debatido. el hecho de que estos movimientos hayan sido detectados solamente en estructuras cristalogr\u00e1ficas de mutantes, pero no en la prote\u00edna nativa debido a la dificultad de acumular el intermediario n, ha hecho dudar de su existencia. De la misma manera los trabajos de epr en prote\u00edna marcada con una sonda de spin han dado valores muy diversos para la magnitud de estos movimientos, creando tambi\u00e9n dudas sobre su existencia y su implicaci\u00f3n en la funci\u00f3n. este trabajo ha tenido como objetivo estudiar la implicaci\u00f3n de la flexibilidad de las h\u00e9lices e-f y f-g en la funci\u00f3n de la br. para ello se ha estudiado la implicaci\u00f3n de ampliar la longitud, y por tanto la flexibilidad, del bucle e-f mediante la sustituci\u00f3n del bucle nativo por su hom\u00f3logo en la rodopsina. Este mutante ha sido denominado loop5. por otro lado se ha restringido la flexibilidad de las h\u00e9lices e y f mediante la expresi\u00f3n del doble mutante f153c\/r175c y la formaci\u00f3n de un puente disulfuro. Para restringir la flexibilidad de las h\u00e9lices f-g se us\u00f3 la misma estrategia y se expres\u00f3 el mutante e166c\/a228c. tanto el aumento de la flexibilidad del bucle e-f como la restricci\u00f3n de la movilidad de estas h\u00e9lices y de las h\u00e9lices f y g provoca una profunda alteraci\u00f3n en la funci\u00f3n de transporte, reduci\u00e9ndose la efectividad del mismo a aproximadamente la mitad respecto a la prote\u00edna nativa. Asimismo el estudio de estos mutantes sit\u00faa este cambio entre los intermediarios m y n y demuestra que es imprescindible para que pueda darse el cambio de accesibilidad desde el lado extracelular al lado citoplasm\u00e1tico, mecanismo que asegura que el transporte sea unidireccional.  el aumento de flexibilidad del bucle e-f tiene como consecuencia el aceleramiento del intermediario m. El intermediario n aparece m\u00e1s temprano y tiene un mayor tiempo de vida media. Durante este intermediario ser\u00eda cuando se produce el movimiento de las h\u00e9lices y durante el cual la prote\u00edna tiene una apertura hacia el lado citoplasm\u00e1tico. al restringir la flexibilidad de las h\u00e9lices e-f los cambios en el fotociclo no parecen tan relevantes, sin embargo el estudio del intermediario n mediante ftir muestra una alteraci\u00f3n en la zona de la amida i que corresponde a los cambios estructurales que tienen lugar durante este intermediario.  la restricci\u00f3n de la flexibilidad de las h\u00e9lices f-g provoca profundas alteraciones en el fotociclo favoreciendo la acumulaci\u00f3n del intermediario m. Los intermediario n y o (durante los cuales se reprotona la br) no se forman y el fotociclo sigue otro camino alternativo para volver al estado basal. por tanto, la flexibilidad de las h\u00e9lices e, f y g tiene un papel muy relevante en la funci\u00f3n de la br, sugiriendo que este mecanismo es importante en las prote\u00ednas que constan de 7 h\u00e9lices transmembrana, como las gpcrs.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Influencia de la movilidad de las h\u00e9lices en la funci\u00f3n de la bacteriorodopsina<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Influencia de la movilidad de las h\u00e9lices en la funci\u00f3n de la bacteriorodopsina <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Rosana Sim\u00f3n V\u00e1zquez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Aut\u00f3noma de barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 24\/02\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Esteve Padr\u00f3s Morell<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: pere Garriga sol\u00e9 <\/li>\n<li>g\u00e9rard Leblanc (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Rosana Sim\u00f3n V\u00e1zquez La bacteriorodopsina (br) es una prote\u00edna transmembrana expresada por la arqueobacteria h.Salinarum. 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