{"id":92656,"date":"2009-01-04T00:00:00","date_gmt":"2009-01-04T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/plasticidad-molecular-de-los-receptores-acoplados-a-protea%c2%adnas-g-en-el-sistema-nervioso-central\/"},"modified":"2009-01-04T00:00:00","modified_gmt":"2009-01-04T00:00:00","slug":"plasticidad-molecular-de-los-receptores-acoplados-a-protea%c2%adnas-g-en-el-sistema-nervioso-central","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica-molecular\/plasticidad-molecular-de-los-receptores-acoplados-a-protea%c2%adnas-g-en-el-sistema-nervioso-central\/","title":{"rendered":"Plasticidad molecular de los receptores acoplados a prote\u00ednas g en el sistema nervioso central"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Laia Canela Pujol <\/strong><\/h2>\n<p>El glutamato, actuando a trav\u00e9s de sus receptores ionotr\u00f3picos y metabotr\u00f3picos, constituye el neurotransmisor excitativo m\u00e1s importante en el sistema nervioso central de los mam\u00edferos mediando el procesamiento de informaci\u00f3n b\u00e1sica del cerebro. La dopamina, actuando a trav\u00e9s de sus gpcrs espec\u00edficos, sirve como importante neurotransmisor en las neuronas del snc involucradas en la funci\u00f3n motora y otras funciones cerebrales. La adenosina, actuando tambi\u00e9n a trav\u00e9s de gpcrs espec\u00edficos, es el neuromodulador clave que regula muchas funciones neurol\u00f3gicas. El objetivo principal de esta tesis fue avanzar en el conocimento de los mecanismos funcionales implicados en la acci\u00f3n del glutamato, la dopamina y la adenosina en el sistema nervioso central. los receptores de adenosina del sistema nervioso central est\u00e1n implicados en la regulaci\u00f3n de distintos patrones de comportamiento y funciones cognitivas, sin embargo, el papel de uno de los subtipos de estos receptores, el receptor a2a de adenosina, en aprendizaje y memoria todav\u00eda no est\u00e1 claro. Se cre\u00f3 una nueva cepa de rata transg\u00e9nica, tgr (nseha2a), que sobreexpresa el receptor    de adenosina principalmente en el cortex cerebral, el hipocampo y el cerebelo y se explor\u00f3 la relevancia de esta sobreexpresi\u00f3n en las funciones de aprendizaje y memoria. Se evalu\u00f3 la conducta de estos animales en varias tareas de aprendizaje y memoria (laberinto radial de 6 brazos, laberinto t, reconocimento de objetos y varios paradigmas de laberinto de agua de morris) y otras pruebas para evaluar la actividad motora espont\u00e1nea (campo abierto, laberinto hexagonal de t\u00faneles) y la ansiedad (laberintos positivos), ya que la modificaci\u00f3n de estas conductas podr\u00eda interferir en la evaluaci\u00f3n de la funci\u00f3n cognitiva. La sobreexpresi\u00f3n del receptor a\u00c2\u00bb de adenosina no alter\u00f3 la funci\u00f3n motora ni las conductas emocional y de ansiedad de las ratas tgr, que a su vez mostraron unos niveles normales de aprendizaje dependiente de hipocampo y memoria de referencia espacial. Sin embargo, las ratas tgr presentaron d\u00e9ficits de memoria de trabajo detectados por errores constantes en los brazos ciegos del laberinto radial de 6 brazos, reducci\u00f3n del reconocimento de un objeto nuevo y una falta de mejora en aprendizaje despu\u00e9s de 4 ensayos en un mismo dia, lo cual no se observ\u00f3 en dias consecutivos mediante el laberinto de agua de morris. Dada la interdependencia entre las funciones adenos\u00ednica y dopamin\u00e9rgica, estos resultados apoyan la posibilidad de utilizar las ratas tgr (nseha2a) como modelo animal para d\u00e9ficits de memoria de trabajo y trastorno cognitivo relacionado con la sobreexpresi\u00f3n de los receptores a\u00c2\u00ab de adenosina corticales o con la disfunci\u00f3n prefrontal dopamin\u00e9rgica, tal y como se ha observado en pacientes con esquizofrenia o parkinson. el concepto de maquinaria de transducci\u00f3n de se\u00f1al de los gpcr se ha desarrollado recientemente. La idea simplista que considera al receptor como una unidad funcional que s\u00f3lo interacciona con su ligando y sistema efector se ha desarrollado hasta llegar a una concepci\u00f3n de transducci\u00f3n de se\u00f1al mucho m\u00e1s compleja. Estos mecanismos de transducci\u00f3n de se\u00f1al incluyen la formaci\u00f3n de complejos multiproteicos en los que participan interacciones receptor-receptor y receptor-prote\u00edna intraceluar. As\u00ed pues, nos plantemos el objetivo de \u00c2\u00a1identificar prote\u00ednas intracelulares que interaccionaran con la cola c-terminal del receptor humano a2a de adenosina y dilucidar si la interacci\u00f3n es relevante para la funci\u00f3n del receptor. Mediante un cribado de doble h\u00edbrido se indentific\u00f3 necab2, una proteina neuronal de uni\u00f3n a calcio, como prote\u00edna de uni\u00f3n al receptor a2a de adenosina (a^r) interaccionando con su dominio c-terminal. Experimentos de colocalizaci\u00f3n, coinmunoprecipitaci\u00f3n y pull-down mostraron una interacci\u00f3n directa y espec\u00edfica entre a^r y necab2 en c\u00e9lulas hek-293 transfectadas y tambi\u00e9n en estriado de rata. La detecci\u00f3n de necab2 y a2ar en estructuras estriatopalidales de rata mediante microscop\u00eda inmunoelectr\u00f3nica indic\u00f3 que ambas prote\u00ednas est\u00e1n codistribuidas en las mismas terminales nerviosas glutamat\u00e9rgicas. La interacci\u00f3n de necab2 con a2ar modula la expresi\u00f3n del receptor en la superficie celular, su internalizaci\u00f3n dependiente de ligando y la activaci\u00f3n mediada por receptor de la via de las mapk. En conjunto, estos resultados muestran que a^r interacciona con necab2 en neuronas estriatales que coexpresan ambas prote\u00ednas y que la interacci\u00f3n es relevante para la funci\u00f3n de a2ar. por otro lado, tambi\u00e9n nos plantemos identificar prote\u00ednas de uni\u00f3n al receptor metabotr\u00f3pico de glutamato mglu5 y analizar si modulan tambi\u00e9n la funci\u00f3n del receptor. Mediante un cribado de doble-h\u00edbrido en levadura, se identific\u00f3 la uni\u00f3n entre a-actinina-1, \u00aba major f-actin cross-linking protein\u00bb, y el dominio c-terminal del receptor metabotr\u00f3pico de glutamato del tipo 5b (receptor mglu5b). Experimentos de coexpresi\u00f3n, coinmunoprecipitaci\u00f3n y pull-down demostraron una interacci\u00f3n pr\u00f3xima y espec\u00edfica entre el receptor mglu5b y a-actinina-1 en c\u00e9lulas hek-293 transfectadas y estriado de rata. La interacci\u00f3n de a-actinina-1 con el receptor mglu5b modulaba la expresi\u00f3n del receptor en la superficie celular, que a su vez depend\u00eda de la interacci\u00f3n de a-actinina-1 con el citoesqueleto de actina. Adem\u00e1s, la interacci\u00f3n a-actlnina-1\/receptor mglu5b regulaba la activaci\u00f3n mediada por receptor de la via de las prote\u00ednas kinasas activadas por mit\u00f3genos. En conjunto, estos resultados indican que hay una asociaci\u00f3n entre mglu5b y el citoesqueleto de actina dependiente de a-actinina-1 que modula la funci\u00f3n y la expresi\u00f3n del receptor en la superficie celular. existen evidencias de la interacci\u00f3n entre los receptores a2a de adenosina y mglu5 de glutamato, sin embargo todav\u00eda se desconoce si esta interacci\u00f3n es directa o indirecta. Nos planteamos dilucidar si los receptores am de adenosina y mglu5 de glutamato comparten alguna prote\u00edna de uni\u00f3n. Pudimos demostrar la interacci\u00f3n espec\u00edfica entre el receptor mglu5b y necab2, tanto en c\u00e9lulas hek-293 transfectadas como en hipocampo de rata. Experimentos de pull-down mostraron que concentraciones crecientes de calcio reduc\u00edan dr\u00e1sticamente la habilidad de estas prote\u00ednas para interaccionar entre ellas. Se detectaron necab2 y el receptor mglu5b en la formaci\u00f3n de hipocampo de rata mediante microscop\u00eda inmunoelect\u00f3nica, mostrando la co-distribuci\u00f3n de ambas prote\u00ednas en los mismos compartimentos subcelulares de las c\u00e9lulas piramidales. Por otro lado, la interacci\u00f3n entre necab2 y el receptor mglu5b regula la activaci\u00f3n de la v\u00eda de las mapk mediada por el receptor. Estos resultados indican que necab2 interacciona f\u00edsicamente con el receptor mglu5b de glutamato y modula su funcionalidad. existen muchos datos que evidencian la existencia complejos de receptores homom\u00e9ricos y heterom\u00e9ricos funcionales, que involucran receptores acoplados a prote\u00edna g (gpcr), incluyendo los receptores a2a de adenosina, d2 de dopamina y mglu5 de glutamato. El papel de estos complejos en la funci\u00f3n de los receptores parece ser m\u00faltiple, incluyendo la heteromodulaci\u00f3n del reconocimiento de ligando, la se\u00f1alizaci\u00f3n y el tr\u00e1fico. En este cap\u00edtulo estudiamos las interacciones de los receptores a\u00c2\u00a1a de adenosina (a2ar)-d2 de dopamina (d2r)-metabotr\u00f3p\u00c2\u00a1co de glutamato 5 (mglu5r) en estriado a nivel transcripcional mediante el estudio comparativo entre la activaci\u00f3n individual y conjunta de estos receptores. Encontramos 164 genes con un patr\u00f3n de expresi\u00f3n distinto con la activaci\u00f3n conjunta de a^r, d2r y mglu5r respecto a \u00c2\u00a1a activaci\u00f3n individual de cada receptor. Entre estos genes, nos centramos en el de la 6-sinucle\u00edna, ya que sus niveles se ve\u00edan aumentados con el triple tratamiento pero sin embargo no estaban modificados con el tratamiento individual. Dado que la p-sinucle\u00edna es una mol\u00e9cula end\u00f3gena que act\u00faa de forma protectora contra la neuropatolog\u00eda de a-sinucle\u00edna y que la activaci\u00f3n conjunta los receptores a2a, d2 y mglu5 da lugar a un aumento de p-sinucle\u00edna, podemos hipotetizar un papel neuroprotector del complejo de receptores a2ar-d2r-mglu5r inducido por la sobreexpresi\u00f3n de p-sinucle\u00edna. la diversidad de redes proteicas asociadas a los gpcrs genera una complejidad inesperada que hace m\u00e1s dif\u00edcil la comprensi\u00f3n de la fisiolog\u00eda de estos receptores. Sin embargo, la diversidad y especificidad de estas redes ofrece la oportunidad de descubrir nuevos mecanismos para el control de la oligomerizaci\u00f3n y funci\u00f3n de los gpcr, por lo que todav\u00eda queda mucho camino por recorrer en la investigaci\u00f3n de estas interacciones.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Plasticidad molecular de los receptores acoplados a prote\u00ednas g en el sistema nervioso central<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Plasticidad molecular de los receptores acoplados a prote\u00ednas g en el sistema nervioso central <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Laia Canela Pujol <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 01\/04\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Enric Canela Campos<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Carlos Ciudad g\u00f3mez <\/li>\n<li>olga Valverde granados (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Laia Canela Pujol El glutamato, actuando a trav\u00e9s de sus receptores ionotr\u00f3picos y metabotr\u00f3picos, constituye el neurotransmisor [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[951,115],"tags":[20088,33723,191577,66981],"class_list":["post-92656","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-barcelona","category-bioquimica-molecular","tag-carlos-ciudad-gomez","tag-enric-canela-campos","tag-laia-canela-pujol","tag-olga-valverde-granados"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/92656","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=92656"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/92656\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=92656"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=92656"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=92656"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}