{"id":92760,"date":"2018-03-11T10:11:53","date_gmt":"2018-03-11T10:11:53","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/desarrollo-de-metodos-para-el-aislamiento-y-la-deteccion-de-toxinas-marinas-en-productos-de-la-pesca-y-la-acuicultura\/"},"modified":"2018-03-11T10:11:53","modified_gmt":"2018-03-11T10:11:53","slug":"desarrollo-de-metodos-para-el-aislamiento-y-la-deteccion-de-toxinas-marinas-en-productos-de-la-pesca-y-la-acuicultura","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/santiago-de-compostela\/desarrollo-de-metodos-para-el-aislamiento-y-la-deteccion-de-toxinas-marinas-en-productos-de-la-pesca-y-la-acuicultura\/","title":{"rendered":"Desarrollo de m\u00e9todos para el aislamiento y la detecci\u00f3n de toxinas marinas en productos de la pesca y la acuicultura"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Mar\u00eda  Del Carmen Alfonso Mendez <\/strong><\/h2>\n<p>El objetivo de la presente tesis doctoral fue desarrollar m\u00e9todos para el aislamiento y la detecci\u00f3n de ficotoxinas marinas. Se puso a punto la polarizaci\u00f3n de la fluorescencia (fp) como t\u00e9cnica anal\u00edtica base para dise\u00f1ar m\u00e9todos r\u00e1pidos y asequibles de detecci\u00f3n de toxinas.  se estudi\u00f3 la uni\u00f3n entre las yessotoxinas (ytxs) y las fosfodiesterasas celulares mediante la fp, con el fin de obtener un m\u00e9todo para cuantificar estas ficotoxinas. Adem\u00e1s se pusieron a punto m\u00e9todos de extracci\u00f3n y limpieza de las ytxs a partir de muestras contaminadas. en el laboratorio de farmacolog\u00eda se hab\u00eda descrito con anterioridad la uni\u00f3n entre las fosfodiesterasas de nucle\u00f3tidos c\u00edclicos celulares y las ytxs. Bas\u00e1ndose en este hecho se utiliz\u00f3 la fp para dise\u00f1ar un m\u00e9todo de detecci\u00f3n de este grupo de toxinas. En primer lugar se puso a punto esta tecnolog\u00eda anal\u00edtica estudiando la uni\u00f3n de avidina y biotina, marcando una de las dos especies con un derivado fluorescente. A continuaci\u00f3n se utiliz\u00f3 la fp para detectar la uni\u00f3n de la ytx y las fosfodiesterasas i y ii marcadas con un derivado de la fluoresce\u00edna, observando que era posible cuantificar la cantidad de toxina existente en un medio control. Posteriormente se realiz\u00f3 un an\u00e1lisis de los distintos m\u00e9todos de extracci\u00f3n de las ytxs a partir de muestras de mejill\u00f3n contaminado, determinando cu\u00e1les eran los m\u00e1s adecuados por no presentar efecto matriz en el m\u00e9todo de detecci\u00f3n. Durante este an\u00e1lisis tambi\u00e9n se dise\u00f1\u00f3 un procedimiento de limpieza para reducir las interferencias de los extractos en la fp. Finalmente el conjunto formado por el m\u00e9todo de extracci\u00f3n y limpieza y el m\u00e9todo de detecci\u00f3n se valid\u00f3 con muestras de mejill\u00f3n contaminado durante una marea roja, observ\u00e1ndose que no s\u00f3lo era adecuado para cuantificar la yessotoxina presente en la muestra, sino tambi\u00e9n otros an\u00e1logos como la homoyessotoxina y la hidroxiyessotoxina.  por otro lado, se desarroll\u00f3 un procedimiento para la purificaci\u00f3n a gran escala de azaspir\u00e1cidos (azas) a partir de mejillones contaminados con varias toxinas lipof\u00edlicas y se investig\u00f3 la estabilidad de las toxinas obtenidas. La finalidad de este estudio era disponer de elevadas cantidades de compuestos puros para obtener est\u00e1ndares de alta calidad. en el laboratorio de farmacolog\u00eda se dispon\u00eda de mejillones contaminados con toxinas dsp y azas procedentes de una marea roja de irlanda. Con este material se puso a punto un m\u00e9todo de purificaci\u00f3n a gran escala de los diferentes an\u00e1logos de azas. Se dise\u00f1\u00f3 un procedimiento que consta de tres etapas consecutivas: una extracci\u00f3n de la muestra de mejill\u00f3n con varios disolventes org\u00e1nicos, una separaci\u00f3n en fase s\u00f3lida para aislar los azas de las toxinas dsp y una cromatograf\u00eda l\u00edquida para purificar cada uno de los an\u00e1logos. En el transcurso de la purificaci\u00f3n se observ\u00f3 una relaci\u00f3n entre la estabilidad de los azas y la temperatura de secado durante el proceso de separaci\u00f3n. Por ello se llev\u00f3 a cabo un estudio sobre la influencia de la temperatura y el ph en la estabilidad de los distintos an\u00e1logos aislados.  de los resultados obtenidos se extraen las siguientes conclusiones:  1.\tLa polarizaci\u00f3n de la fluorescencia sirve para detectar la uni\u00f3n entre las fosfodiesteras y la yessotoxina. 2.\tLa polarizaci\u00f3n de la fluorescencia permite cuantificar la yessotoxina, la homoyessotoxina y la hidroxiyessotoxina en una muestra. Para ello es indispensable seguir un procedimiento de limpieza con una extracci\u00f3n en cartucho de s\u00edlica y un filtro para pesos moleculares menores de 10000, precedido de una extracci\u00f3n con metanol o de una extracci\u00f3n con acetona y particiones con diclorometano. 3.\tLa acetona y el metanol separan las toxinas diarreicas de los azaspir\u00e1cidos mediante una extracci\u00f3n en fase s\u00f3lida con cartucho de s\u00edlica. 4.\tLa fase m\u00f3vil meoh\/h2o\/acoh (700\/300\/1) es la m\u00e1s adecuada para purificar mediante cromatograf\u00eda l\u00edquida los azaspir\u00e1cidos 1-5. 5.\tElevadas temperaturas (mayores de 40\u00c2\u00bac) y valores de ph extremos (menores de 1 y mayores de 12) modifican la estructura molecular de los azaspir\u00e1cidos en disoluci\u00f3n y eliminan su actividad t\u00f3xica. Sin embargo, los tejidos de moluscos en los que se encuentran ejercen un efecto protector frente a dichas variables.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Desarrollo de m\u00e9todos para el aislamiento y la detecci\u00f3n de toxinas marinas en productos de la pesca y la acuicultura<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Desarrollo de m\u00e9todos para el aislamiento y la detecci\u00f3n de toxinas marinas en productos de la pesca y la acuicultura <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Mar\u00eda  Del Carmen Alfonso Mendez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Santiago de compostela<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 13\/04\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Mar\u00eda  Amparo Alfonso Ranca\u00f1o<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: merc\u00e9des Rodr\u00edguez vieytes <\/li>\n<li>beatriz Reguera  ramirez (vocal)<\/li>\n<li>Juan  Manuel Vieytes baptista de sousa (vocal)<\/li>\n<li>Antonio  Manuel De almeida dias (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Mar\u00eda Del Carmen Alfonso Mendez El objetivo de la presente tesis doctoral fue desarrollar m\u00e9todos para el 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