{"id":93228,"date":"2009-11-05T00:00:00","date_gmt":"2009-11-05T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/embriogenesis-somatica-en-pino-pinonero-pinus-pinea-l\/"},"modified":"2009-11-05T00:00:00","modified_gmt":"2009-11-05T00:00:00","slug":"embriogenesis-somatica-en-pino-pinonero-pinus-pinea-l","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/conservacion-de-florestas\/embriogenesis-somatica-en-pino-pinonero-pinus-pinea-l\/","title":{"rendered":"Embriog\u00e9nesis som\u00e1tica en pino pi\u00f1onero (pinus pinea l.)"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Elena Carneros Garc\u00eda <\/strong><\/h2>\n<p>El pino pi\u00f1onero (pinus pinea l.) Es una de las especies arb\u00f3reas m\u00e1s caracter\u00edsticas de la flora mediterr\u00e1nea, con gran importancia ecol\u00f3gica, social y econ\u00f3mica. Debido a su rusticidad y porte aparasolado puede considerarse como especie destinada a usos paisaj\u00edsticos y recreativos, pero su aprovechamiento principal es el fruto (pi\u00f1ones comestibles), siendo espa\u00f1a uno de los pa\u00edses con mayor producci\u00f3n. La mejora gen\u00e9tica de esta especie va orientada fundamentalmente a una utilizaci\u00f3n agron\u00f3mica y requiere la identificaci\u00f3n de individuos buenos productores de pi\u00f1a y pi\u00f1\u00f3n. El pino pi\u00f1onero se muestra recalcitrante en su capacidad morfog\u00e9nica, por lo que es necesario desarrollar t\u00e9cnicas de propagaci\u00f3n vegetativa eficaces que permitan la mejora de esta especie. la embriog\u00e9nesis som\u00e1tica es un proceso in vitro que incluye el desarrollo de masas embriog\u00e9nicas en embriones bipolares capaces de madurar, germinar y aclimatarse a condiciones ex vitro. Hoy se considera como la v\u00eda m\u00e1s adecuada para la micropropagaci\u00f3n clonal de especies forestales, alcanz\u00e1ndose recientemente grandes progresos en las con\u00edferas. Este trabajo se ha centrado en el estudio de determinados aspectos de la embriog\u00e9nesis som\u00e1tica, utilizada como v\u00eda para la regeneraci\u00f3n clonal de \u00e1rboles selectos de pino pi\u00f1onero, siendo la primera vez que se ha abordado esta t\u00e9cnica de micropropagaci\u00f3n en esta especie. La memoria de tesis se ha dividido en varios cap\u00edtulos, que se corresponden con las sucesivas fases del proceso: inducci\u00f3n de la respuesta embriog\u00e9nica, proliferaci\u00f3n y mantenimiento del material embriog\u00e9nico inducido, maduraci\u00f3n de los embriones som\u00e1ticos, germinaci\u00f3n y conversi\u00f3n de los embriones en plantas. Adem\u00e1s se ha evaluado el efecto de la crioconservaci\u00f3n sobre la recuperaci\u00f3n del crecimiento de distintas l\u00edneas embriog\u00e9nicas. se ha estudiado la respuesta embriog\u00e9nica de diferentes tipos de explantos, tanto embrionarios (embriones cig\u00f3ticos maduros e inmaduros) como no embrionarios (estr\u00f3bilos femeninos, estr\u00f3bilos masculinos, ac\u00edculas en expansi\u00f3n, yemas y hojas de inserci\u00f3n aislada). Para ello se han ensayado distintas condiciones de inducci\u00f3n, donde se ha evaluado la influencia de factores como el genotipo, la composici\u00f3n del medio nutritivo, y tipos y niveles de reguladores del crecimiento. \u00fanicamente se ha conseguido la respuesta embriog\u00e9nica a partir de explantos embrionarios, aunque con los no embrionarios se han obtenido respuestas prometedoras. Las mayores frecuencias de inducci\u00f3n se han obtenido con los embriones cig\u00f3ticos inmaduros. El protocolo de inducci\u00f3n se ha basado en el cultivo de megagametofitos completos, la aplicaci\u00f3n de los reguladores del crecimiento 2,4-d (\u00e1cido 2,4-diclorofenoxiac\u00e9tico) y bap (6-bencilaminopurina), y un aporte de nitr\u00f3geno org\u00e1nico. El tejido embriog\u00e9nico aparece en forma de extrusi\u00f3n en el extremo del micropilo del megagametofito. La proliferaci\u00f3n del material embriog\u00e9nico se ha llevado a cabo en el medio de inducci\u00f3n modificado, manteni\u00e9ndose \u00e9sta capacidad proliferativa con el tiempo, siendo su potencial multiplicativo muy alto. Para el mantenimiento de las l\u00edneas embriog\u00e9nicas se han realizado subcultivos bisemanales a medio de cultivo fresco. La diferenciaci\u00f3n de los embriones som\u00e1ticos ha requerido un precultivo de las masas embriog\u00e9nicas en medio con los nutrientes reducidos y bajas concentraciones de reguladores; posteriormente, las masas se han disgregado en medio con carb\u00f3n activo, cultiv\u00e1ndose en presencia de aba (\u00e1cido absc\u00edsico) y alto contenido osm\u00f3tico. La desecaci\u00f3n parcial de las masas embriog\u00e9nicas ha favorecido la maduraci\u00f3n. Cuando los embriones alcanzan el estado cotiledonar se ha procedido a su germinaci\u00f3n, y a la transferencia a condiciones ex vitro de las plantas som\u00e1ticas para su aclimataci\u00f3n. las frecuencias de iniciaci\u00f3n de tejido embriog\u00e9nico en el pino pi\u00f1onero han sido relativamente bajas, pero similares a las obtenidas inicialmente en otras especies del g\u00e9nero pinus. Se sugiere la existencia de una ventana en el desarrollo del embri\u00f3n cig\u00f3tico m\u00e1s sensible a la inducci\u00f3n, pues las mayores respuestas se han obtenido cuando el embri\u00f3n se encontraba entre el estado de poliembrion\u00eda de partici\u00f3n y el estado cotiledonar inicial. El medio de cultivo y los reguladores del crecimiento tambi\u00e9n han influido en las frecuencias de iniciaci\u00f3n, obteni\u00e9ndose los mejores resultados con el medio litvay modificado, suplementado con l-glutamina e hidrolizado de case\u00edna y la combinaci\u00f3n de 9 m de 2,4-d y 4,5m de bap. Se ha observado una fuerte influencia del genotipo en las fases de inducci\u00f3n, proliferaci\u00f3n y maduraci\u00f3n de los embriones som\u00e1ticos. La maduraci\u00f3n de los embriones som\u00e1ticos se ha visto afectada por la elevada de proliferaci\u00f3n de los cultivos, no obstante se han obtenido tasas de maduraci\u00f3n similares a las de otras especies de pinos. La germinaci\u00f3n de los embriones som\u00e1ticos se ha mejorado realizando un tratamiento pregerminativo de los cultivos en fr\u00edo. La germinaci\u00f3n de los embriones se ha visto influ\u00edda por su posici\u00f3n en los medios de cultivo, obteni\u00e9ndose mayores frecuencias cuando se disponen en las placas en posici\u00f3n horizontal y \u00e9stas se inclinan 40\u00c2\u00ba. El desarrollo de las pl\u00e1ntulas se ha estimulado modificando el medio de cultivo y la intensidad luminosa. Se ha logrado la regeneraci\u00f3n de plantas a partir de los embriones germinados, a trav\u00e9s de la optimizaci\u00f3n de las fases de maduraci\u00f3n y germinaci\u00f3n. se ha desarrollado un protocolo de crioconservaci\u00f3n de l\u00edneas embriog\u00e9nicas de pino pi\u00f1onero, lo que evitar\u00eda la p\u00e9rdida de vigor y capacidad morfog\u00e9nica de las masas embriog\u00e9nicas por el cultivo prolongado. Se ha evaluado la influencia de los agentes crioprotectores (sorbitol y dmso) en la viabilidad del material embriog\u00e9nico, observ\u00e1ndose un cierto grado de toxicidad que revierte con los subcultivos adem\u00e1s de la influencia del genotipo en la respuesta. La recuperaci\u00f3n del crecimiento de las l\u00edneas embriog\u00e9nicas crioconservadas pasa por una fase de latencia, igual\u00e1ndose al crecimiento de las l\u00edneas no crioconservadas con los subcultivos. La mezcla de 0,4 m de sorbitol y 15 % de dmso ha proporcionado la mayor tasa de recuperaci\u00f3n. Ha sido posible la maduraci\u00f3n y germinaci\u00f3n de los embriones som\u00e1ticos procedentes del material crioconservado, obteni\u00e9ndose embriones capaces de convertirse en plantas.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Embriog\u00e9nesis som\u00e1tica en pino pi\u00f1onero (pinus pinea l.)<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Embriog\u00e9nesis som\u00e1tica en pino pi\u00f1onero (pinus pinea l.) <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Elena Carneros Garc\u00eda <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Alcal\u00e1<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 11\/05\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Cristina Celestino Mur<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: nicolas Jouve de la barreda <\/li>\n<li>isabel Arrillaga mateos (vocal)<\/li>\n<li>Luis alfonso Gil s\u00e1nchez (vocal)<\/li>\n<li>Jes\u00fas Alegre alvaro (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Elena Carneros Garc\u00eda El pino pi\u00f1onero (pinus pinea l.) Es una de las especies arb\u00f3reas m\u00e1s caracter\u00edsticas [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[17426,9819,38670,11550],"tags":[192619,192618,47318,30744,2885,2179],"class_list":["post-93228","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-alcala","category-conservacion-de-florestas","category-plantas-ornamentales","category-reguladores-del-crecimiento-de-las-plantas","tag-cristina-celestino-mur","tag-elena-carneros-garcia","tag-isabel-arrillaga-mateos","tag-jesus-alegre-alvaro","tag-luis-alfonso-gil-sanchez","tag-nicolas-jouve-de-la-barreda"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/93228","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=93228"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/93228\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=93228"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=93228"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=93228"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}