{"id":94231,"date":"2018-03-11T10:13:50","date_gmt":"2018-03-11T10:13:50","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/analisis-molecular-de-mutantes-de-escherichia-coli-resistentes-al-bloqueo-en-diferentes-etapas-de-la-ruta-del-metilerititrol-fosfato-mep\/"},"modified":"2018-03-11T10:13:50","modified_gmt":"2018-03-11T10:13:50","slug":"analisis-molecular-de-mutantes-de-escherichia-coli-resistentes-al-bloqueo-en-diferentes-etapas-de-la-ruta-del-metilerititrol-fosfato-mep","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/barcelona\/analisis-molecular-de-mutantes-de-escherichia-coli-resistentes-al-bloqueo-en-diferentes-etapas-de-la-ruta-del-metilerititrol-fosfato-mep\/","title":{"rendered":"An\u00e1lisis molecular de mutantes de escherichia coli resistentes al bloqueo en diferentes etapas de la ruta del metilerititrol fosfato (mep)"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Eva Mar\u00eda Uros Gracia <\/strong><\/h2>\n<p>Los isoprenoides son compuestos presentes en todos los seres vivos. Todos ellos provienen de unos precursores comunes, isopentenil difosfato (ipp) y su isomero dimetilalil difosfato (dmapp). Estos compuestos son sintetizados en bacterias a trav\u00e9s de la ruta del metil eritritol fosfato (mep) exclusiva de estos organismos y de las plantas. Llos enzimas de la ruta del mep son esenciales ya que su falta de funci\u00f3n es letal para los organismos que la presentan. Para poder estudiar esta ruta se gener\u00f3 en el grupo de investigaci\u00f3n una cepa de e.Coli recombinante pod\u00eda sintetizar ipp a partir de mva y que permit\u00eda que cepas con genes de la ruta mep deleccionadas pudieran sobrevivir gracias a agregar mva al medio de cultivo. Sin embargo se ha podido determinar que con cierta frecuencia existen bacterias deleccionadas en distintos genes de esta ruta que pod\u00edan suprimir el fenotipo letal. En trabajos anteriores se obtuvieron cepas supresoras en los dos primero pasos de la ruta. Fue as\u00ed como se desarrollaron estrategias gen\u00e9ticas por medio de las cuales se pudo determinar que ciertos genes que presentaban un cambio nucleot\u00eddico pod\u00edan suprimir el fenotipo letal de estas cepas deleccionadas. en esta tesis se ha descrito que una cepa defectiva del primer gen de esta ruta, dxs, puede suplir el fenotipo letal con el gen acee mutado. Este gen codifica para la subunidad e1 de la piruvato deshidrogenasa (pdh). Sin embargo se ha confirmado la presencia de las mutaciones en este gen para poder suplir esta funci\u00f3n como las descritas en trabajos anteriores e636q como en este trabajo l633r, e636g y q408r. Se han realizado estudios de actividad de estas prote\u00ednas e1-pdh mutadas observando la actividad tanto e1-pdh como dxs. En el caso del segundo enzima de la ruta, dxr, su defecto de funci\u00f3n puede ser suplido por una mutaci\u00f3n d296g en el gen gatc. Este gen forma parte del sistema fosfotransferasa por el cual se introduce el az\u00facar galactitol en la c\u00e9lula sin fosforilarlo. Se realizaron tanto estudios de crecimiento como intentos de expresi\u00f3n de esta prote\u00edna sin \u00e9xito. Para el resto de cepas defectivas no se ha conseguido obtener cepas supresoras de este fenotipo letal. Se ha descrito que estas cepas defectivas en los distintos genes de la ruta pod\u00edan tras un crecimiento previo en medio l\u00edquido con mva, estas cepas pod\u00edan sobrevivir en un medio l\u00edquido sin mva. Esto se observ\u00f3 en las cepas defectivas para el primer enzima de esta ruta. Durante este trabajo se han realizado pruebas de crecimiento de los distintos enzimas de la ruta en dichas condiciones y se determin\u00f3 que todas presentaban este crecimiento \u00fanicamente en una primera fase (fase i), en un primer cultivo, sin embargo en el caso de las cepas defectivas para los dos primeros enzimas de la v\u00eda tambi\u00e9n segu\u00edan su crecimiento en la siguiente fase (fase ii). En estos cultivos de fase i se determin\u00f3 realizar experimentos de espectrometr\u00eda de masas (lc\/ms-ms) para la detecci\u00f3n de los intermediarios de la ruta en bacterias. Se detecta la presencia de dxp y mecpp en la fase i del cultivo de la cepa defectiva del gen dxs.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>An\u00e1lisis molecular de mutantes de escherichia coli resistentes al bloqueo en diferentes etapas de la ruta del metilerititrol fosfato (mep)<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 An\u00e1lisis molecular de mutantes de escherichia coli resistentes al bloqueo en diferentes etapas de la ruta del metilerititrol fosfato (mep) <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Eva Mar\u00eda Uros Gracia <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 19\/06\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Albert Boronat Margosa<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: albert Ferrer prats <\/li>\n<li>rosa Mar\u00eda Ba\u00f1os molina (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Eva Mar\u00eda Uros Gracia Los isoprenoides son compuestos presentes en todos los seres vivos. Todos ellos provienen [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[951,36483,36606,11152,978],"tags":[11105,13782,194309,159449],"class_list":["post-94231","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-barcelona","category-biologia-molecular","category-biologia-molecular-de-microorganismos","category-metabolismo-bacteriano","category-metabolismo-microbiano","tag-albert-boronat-margosa","tag-albert-ferrer-prats","tag-eva-maria-uros-gracia","tag-rosa-maria-banos-molina"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/94231","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=94231"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/94231\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=94231"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=94231"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=94231"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}