{"id":94420,"date":"2018-03-11T10:14:06","date_gmt":"2018-03-11T10:14:06","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/desarrollo-y-validacion-de-un-sistema-de-deteccion-y-tipificacion-de-papilomavirus-humano\/"},"modified":"2018-03-11T10:14:06","modified_gmt":"2018-03-11T10:14:06","slug":"desarrollo-y-validacion-de-un-sistema-de-deteccion-y-tipificacion-de-papilomavirus-humano","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/microbiologia\/desarrollo-y-validacion-de-un-sistema-de-deteccion-y-tipificacion-de-papilomavirus-humano\/","title":{"rendered":"Desarrollo y validaci\u00f3n de un sistema de detecci\u00f3n y tipificaci\u00f3n de papilomavirus humano"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Maite Hern\u00e1ndez Men\u00e9ndez <\/strong><\/h2>\n<p>El virus del papiloma humano (vph) est\u00e1 asociado a lesiones benignas, pre-invasivas e invasivas en diferentes localizaciones. Actualmente se reconocen m\u00e1s de 100 tipos de vph, de ellos 40 infectan el tracto anogenital humano. De acuerdo a su oncogenicidad cervical, 15 han sido clasificados de alto riesgo para desarrollar c\u00e1ncer cervical, 3 han sido clasificados como de probable alto riesgo, 12 como de bajo riesgo y 3 como de riesgo indeterminado. Los tipos de alto riesgo, fundamentalmente el 16 y el 18, son considerados agentes etiol\u00f3gicos del c\u00e1ncer de c\u00e9rvix uterino (ccu). Los resultados de diferentes estudios epidemiol\u00f3gicos realizados a nivel mundial han aportado datos interesantes acerca de la contribuci\u00f3n de estos virus al desarrollo del ccu y el comportamiento de diferentes factores de riesgo en las diferentes \u00e1reas geogr\u00e1ficas; lo que ha permitido establecer las directrices para contribuir desde el cribado y la vacunaci\u00f3n, a disminuir las altas tasas de incidencia y mortalidad por ccu. Los nuevos algoritmos de cribado propuestos contemplan la detecci\u00f3n molecular del vph como primer paso. Cuba pertenece al \u00e1rea geogr\u00e1fica de am\u00e9rica latina y el caribe, donde esta enfermedad cobra miles de vidas femeninas anualmente. Los sistemas comerciales disponibles en la actualidad para la detecci\u00f3n y tipado de vph son caros no estando al alcance de los pa\u00edses en v\u00edas de desarrollo. Por tal raz\u00f3n, nos propusimos: 1. Desarrollar un sistema de genotipado de vph mediante t\u00e9cnicas de biolog\u00eda molecular, basado en la basado en la detecci\u00f3n de adn v\u00edrico por un sistema de pcr e hibridaci\u00f3n reversa, con sensibilidad y especificidad adecuadas para el diagn\u00f3stico molecular pero con un coste inferior a los sistemas comerciales para su posterior utilizaci\u00f3n en estudios poblacionales de la infecci\u00f3n por vph en cuba. 2. Validar el sistema desarrollado empleando t\u00e9cnicas de genotipado comerciales en muestras positivas y negativas al vph. Para su desarrollo y optimizaci\u00f3n se emplearon sondas de vph (6, 11, 16, 18,31,33,45, 51, 52 y 59), los clones de vph (6, 11, 16, 18,31,39,45 y 51). En la validaci\u00f3n posterior del sistema se emplearon 176 muestras positivas y 120 muestras negativas a vph, todas analizadas por el sistema comercial de detecci\u00f3n de vph, captura de h\u00edbridos 2. Todas las muestras positivas, as\u00ed como aquellas negativas que amplificaron con la pcr (gp5+\/6+) fueron genotipadas por el sistema de genotipado experimental (sge) y comprobados por el sistema comercial hpv genotyping linear array (roche). En cumplimiento de los objetivos propuestos concluimos que: se dise\u00f1\u00f3 un nuevo sistema de genotipado basado en la hibridaci\u00f3n reversa, que emplea los primer generales gp5+\/6+ marcados con biotina. La tira reactiva fabricada contiene 11 tipos de vph, 9 especialmente prevalentes y responsables del c\u00e1ncer de c\u00e9rvix y 2 de bajo riesgo. La sensibilidad de la tira se encuentra entre 1 y 1000 copias seg\u00fan el genotipo analizado. Los estudios intraensayo e interensayo mostraron una reproducibilidad del 100%, no se encontraron reacciones cruzadas entre genotipos. Los niveles de detecci\u00f3n de los geotipos de alto riesgo m\u00e1s prevalentes fue excelente. Por ello este m\u00e9todo puede ser \u00fatil en los estudios epidemiol\u00f3gicos realizados en pa\u00edses en desarrollo donde la infecci\u00f3n por vph es una amenaza a la salud de la mujer.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Desarrollo y validaci\u00f3n de un sistema de detecci\u00f3n y tipificaci\u00f3n de papilomavirus humano<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Desarrollo y validaci\u00f3n de un sistema de detecci\u00f3n y tipificaci\u00f3n de papilomavirus humano <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Maite Hern\u00e1ndez Men\u00e9ndez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 C\u00e1diz<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 24\/06\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Manuel Antonio Rodr\u00edguez Iglesias<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Mar\u00eda Beltr\u00e1n dub\u00f3n <\/li>\n<li>Mar\u00eda teresa P\u00e9rez gracia (vocal)<\/li>\n<li>Rafael Comino delgado (vocal)<\/li>\n<li>Javier Aznar martin (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Maite Hern\u00e1ndez Men\u00e9ndez El virus del papiloma humano (vph) est\u00e1 asociado a lesiones benignas, pre-invasivas e invasivas 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