{"id":94603,"date":"2018-03-11T10:14:23","date_gmt":"2018-03-11T10:14:23","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/cistatinas-de-cebada-protea%c2%adnas-de-defensa-contra-artropodos\/"},"modified":"2018-03-11T10:14:23","modified_gmt":"2018-03-11T10:14:23","slug":"cistatinas-de-cebada-protea%c2%adnas-de-defensa-contra-artropodos","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/ciencias-agrarias\/cistatinas-de-cebada-protea%c2%adnas-de-defensa-contra-artropodos\/","title":{"rendered":"Cistatinas de cebada: prote\u00ednas de defensa contra artr\u00f3podos"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Laura Carrillo Gil <\/strong><\/h2>\n<p>Las cistatinas son un grupo de prote\u00ednas identificadas en animales, plantas y algunos microorganismos que inhiben ciste\u00edn proteasas c1a, de la familia de la papa\u00edna. Las cistatinas de plantas o fitocistatinas tienen un papel end\u00f3geno relacionado con el intercambio proteico y la muerte celular programada y se ha demostrado que act\u00faan como prote\u00ednas de defensa frente a plagas y pat\u00f3genos.     en cebada, hordeum vulgare l., Se ha identificado la familia completa de cistatinas compuesta por trece miembros, hvcpi-1 a 13. Siete de ellos hab\u00edan sido previamente caracterizados. En este trabajo se ha completado la caracterizaci\u00f3n de todos los miembros de esta familia de cistatinas y se ha evaluado su actividad frente a artr\u00f3podos plaga.      todas las cistatinas de cebada mantienen conservados el motivo larfav, exclusivo de vegetales, y los tres motivos implicados en la uni\u00f3n enzima-inhibidor, aunque en algunos casos con peque\u00f1as variaciones. Adem\u00e1s, se ha determinado que la cistatina hvcpi-4 posee una extensi\u00f3n carboxilo terminal con un motivo conservado implicado en la inhibici\u00f3n de ciste\u00edn proteasas c13 de la familia de leguma\u00ednas. Las estructuras tridimensionales de las cistatinas, se han modelizado a partir de la estructura cristalizada de la orizacistatina i de arroz. Los patrones de expresi\u00f3n obtenidos mediante rt-qpcr han indicado que las cistatinas se expresan principalmente en semilla aunque sus mensajeros tambi\u00e9n se acumulan en hojas y ra\u00edces. Adem\u00e1s, se ha determinado la localizaci\u00f3n subcelular de las trece cistatinas, b\u00e1sicamente detectada en el ret\u00edculo endopl\u00e1smico y el aparato de golgi, aunque la cistatina hvcpi-4 aparece tambi\u00e9n en el n\u00facleo y la hvcpi-1 en el n\u00facleo y el citoplasma. Ensayos de inhibici\u00f3n in vitro frente a ciste\u00edn proteasas comerciales tipo catepsina b, h, l y leguma\u00edna han mostrado una capacidad inhibitoria diferencial y espec\u00edfica dentro de la familia de cistatinas de cebada.      en relaci\u00f3n con su funci\u00f3n de defensa, se han estudiado los efectos de las 13 cistatinas sobre diferentes especies de artr\u00f3podos cuyos enzimas digestivos m\u00e1s abundantes son de tipo ciste\u00edn proteasa, dianas potenciales de las cistatinas. Concretamente, se han seleccionado: el escarabajo de la patata, leptinotarsa decemlineata (say) y su depredador natural, podisus maculiventris (say), la crisomela del ma\u00edz, diabrotica virgifera (leconte), el \u00e1caro, tetranychus urticae koch y dos pulgones, myzus persicae (sulzer) y acyrthosiphon pisum (harris). Las proteasas digestivas del \u00e1caro y de los pulgones no se conoc\u00edan de forma detallada, por lo que se ha realizado una caracterizaci\u00f3n enzim\u00e1tica de estas especies. En todas ellas se ha detectado la presencia de catepsinas l y b y leucin aminopeptidasa pero adem\u00e1s, en el caso del \u00e1caro y del pulg\u00f3n m. Persicae se ha detectado tambi\u00e9n actividad catepsina d y en el caso del pulg\u00f3n a. Pisum se ha detectado actividad carboxipeptidasa. En ninguno de los casos se ha detectado actividad ser\u00edn proteasa.      se ha determinado la capacidad inhibitoria in vitro de las 13 cistatinas frente a la actividad catepsina l y catepsina b presente en extractos proteicos de estos seis artr\u00f3podos, utilizando substratos espec\u00edficos. Las cistatinas han mostrado diferente especificidad por la actividad de los artr\u00f3podos aunque, en general, todas son mejores inhibidores de su actividad tipo catepsina l. La cistatina hvcpi-6 ha resultado ser el inhibidor m\u00e1s potente y ha sido seleccionado para realizar ensayos in vivo con 3 de los artr\u00f3podos anteriormente mencionados: t. Urticae, m. Persicae y a. Pisum.      para estudiar la toxicidad en pulgones, se han preparado dietas artificiales suplementadas con cistatina hvcpi-6 y se han analizado la mortalidad y las alteraciones en sus proteasas digestivas. En el caso de a. Pisum la ingesti\u00f3n de la cistatina en altas concentraciones provoca la muerte del insecto, muerte que esta asociada a la inhibici\u00f3n de ciste\u00edn proteasas digestivas. Por el contrario, en m. Persicae no se observa mortalidad a ninguna de las dosis ensayadas, lo que parece estar relacionada con la sobreproducci\u00f3n de proteasas digestivas. Adem\u00e1s, se han generado plantas transg\u00e9nicas de arabidopsis thaliana (l.) Heyn, que expresan la cistatina hvcpi-6, para estudiar el efecto que produce sobre m. Persicae. Pulgones alimentados con las plantas transg\u00e9nicas han mostrado un retraso en el desarrollo aunque no se han observado alteraciones en la descendencia. Dado que a. Pisum no se alimenta de plantas de arabidopsis, se han realizado bioensayos combinados dieta\/plantas de haba para estudiar los efectos de la cistatina sobre el desarrollo y la descendencia de este pulg\u00f3n. Igual que en el caso de m. Persicae se ha observado un retraso en el desarrollo, pero no hay modificaciones en la descendencia.      el objetivo final de la utilizaci\u00f3n de la cistatina como transgen es la obtenci\u00f3n de variedades agr\u00edcolas m\u00e1s protegidas frente al ataque de plagas y enfermedades. Con este prop\u00f3sito se han generado plantas transg\u00e9nicas de ma\u00edz, zea mays l., Que expresan la cistatina hvcpi-6. Mediante bioensayos se ha podido determinar que la expresi\u00f3n de la cistatina en plantas provoca un retraso en el desarrollo de los \u00e1caros que se han alimentado de las plantas transg\u00e9nicas, que se correlaciona con una disminuci\u00f3n de la actividad tipo catepsina b.         los resultados anteriores, indican que las cistatinas de cebada y en particular la cistatina hvcpi-6, suponen una v\u00eda alternativa para el control de plagas y que un estudio exhaustivo de las mismas permitir\u00eda considerar la expresi\u00f3n piramidal (gene pyramiding) de los genes que codifican estos inhibidores junto con otros genes con car\u00e1cter insecticida, para aumentar la resistencia de las plantas al ataque de artr\u00f3podos y evitar la adaptaci\u00f3n de los mismos.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Cistatinas de cebada: prote\u00ednas de defensa contra artr\u00f3podos<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Cistatinas de cebada: prote\u00ednas de defensa contra artr\u00f3podos <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Laura Carrillo Gil <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Polit\u00e9cnica de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 29\/06\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Isabel Diaz<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: pilar Carbonero zalduegui <\/li>\n<li>gema Mar\u00eda P\u00e9rez farin\u00f3s (vocal)<\/li>\n<li>paul Christou (vocal)<\/li>\n<li>vicente Santiago Marco manceb\u00f3n (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Laura Carrillo Gil Las cistatinas son un grupo de prote\u00ednas identificadas en animales, plantas y algunos microorganismos [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[494,16008],"tags":[71832,194936,194935,194937,16420,194938],"class_list":["post-94603","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-ciencias-agrarias","category-politecnica-de-madrid","tag-gema-maria-perez-farinos","tag-isabel-diaz","tag-laura-carrillo-gil","tag-paul-christou","tag-pilar-carbonero-zalduegui","tag-vicente-santiago-marco-mancebon"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/94603","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=94603"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/94603\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=94603"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=94603"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=94603"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}