{"id":94881,"date":"2009-06-07T00:00:00","date_gmt":"2009-06-07T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/secrecion-procesamiento-proteola%c2%adtico-e-interacciones-moleculares-de-miocilina-implicaciones-en-la-relacion-genotipo-fenotipo-en-glaucoma\/"},"modified":"2009-06-07T00:00:00","modified_gmt":"2009-06-07T00:00:00","slug":"secrecion-procesamiento-proteola%c2%adtico-e-interacciones-moleculares-de-miocilina-implicaciones-en-la-relacion-genotipo-fenotipo-en-glaucoma","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/ciencias-medicas\/secrecion-procesamiento-proteola%c2%adtico-e-interacciones-moleculares-de-miocilina-implicaciones-en-la-relacion-genotipo-fenotipo-en-glaucoma\/","title":{"rendered":"Secreci\u00f3n, procesamiento proteol\u00edtico e interacciones moleculares de miocilina: implicaciones en la relaci\u00f3n genotipo-fenotipo en glaucoma"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Jos\u00e9 Daniel Aroca Aguilar <\/strong><\/h2>\n<p>Se denomina glaucoma a un conjunto de neuropat\u00edas \u00f3pticas que producen una p\u00e9rdida de visi\u00f3n asociada a la muerte apopt\u00f3tica de las c\u00e9lulas ganglionares de la retina. Los glaucomas constituyen la principal causa de ceguera irreversible en los pa\u00edses desarrollados. La forma m\u00e1s com\u00fan, el glaucoma primario de \u00e1ngulo abierto del adulto (gpaa), generalmente est\u00e1 asociado a un incremento de presi\u00f3n intraocular, debido principalmente al aumento de la resistencia al drenaje del humor acuoso a trav\u00e9s de la red trabecular. Aunque existen casos de herencia monog\u00e9nica, la mayor parte de los casos presentan un patr\u00f3n de herencia complejo. El fenotipo patol\u00f3gico depende de m\u00faltiples factores gen\u00e9ticos y probablemente ambientales. Aunque se ha encontrado asociaci\u00f3n del glaucoma con al menos 20 loci distintos, se desconocen la mayor parte de los genes implicados.  el primer gen implicado en gpaa de herencia monog\u00e9nica fue el gen myoc. Tambi\u00e9n se han encontrado mutaciones de este gen en el 3-5% de pacientes con gpaa de herencia compleja. A pesar de la intensa investigaci\u00f3n realizada desde su descubrimiento en 1997, la funci\u00f3n del gen sigue siendo desconocida. Igualmente, no se ha dilucidado completamente el mecanismo por el que las mutaciones en el gen myoc causan glaucoma. Este gen presenta una expresi\u00f3n especialmente abundante en el cuerpo ciliar del ojo, m\u00fasculo esquel\u00e9tico y coraz\u00f3n. Posee tres exones y codifica una prote\u00edna de 504 amino\u00e1cidos, llamada miocilina, presente en el humor acuoso y en la matriz extracelular de la red trabecular. El glaucoma debido a mutaciones en myoc generalmente se asocia a un aumento de la presi\u00f3n intraocular (pio). Miocilina interacciona con diversas prote\u00ednas extracelulares a trav\u00e9s de sus dominios amino y carboxilo terminales. Estas interacciones podr\u00edan desempe\u00f1ar un papel importante en la regulaci\u00f3n de la presi\u00f3n intraocular. Por ello, el objetivo general de este trabajo ha sido analizar la funci\u00f3n de miocilina, estudiando su expresi\u00f3n en l\u00edneas celulares eucariotas y sus interacciones moleculares, as\u00ed como el mecanismo molecular por el que las mutaciones del gen myoc producen glaucoma.   la metodolog\u00eda experimental consisti\u00f3 principalmente en comparar el comportamiento de miocilina humana recombinante silvestre y mutante, expresadas transitoriamente en distintas l\u00edneas celulares de mam\u00edfero en cultivo. Las prote\u00ednas recombinantes se detectaron mediante transferencia western e inmunocitoqu\u00edmica. Para caracterizar las interacciones moleculares de miocilina se utilizaron las t\u00e9cnicas de doble h\u00edbrido de levadura y el an\u00e1lisis en fase s\u00f3lida.   el an\u00e1lisis de la expresi\u00f3n de miocilina en l\u00edneas celulares en cultivo mostr\u00f3 la existencia de un procesamiento endoproteol\u00edtico intracelular en el ret\u00edculo endoplasm\u00e1tico. Este procesamiento tiene lugar en el dominio central de la prote\u00edna, codificado por el ex\u00f3n 2, entre los amino\u00e1cidos arg226 e ile227. Este procesamiento separa el extremo carboxilo terminal, que es secretado, del amino terminal, que es mayoritariamente retenido dentro de la c\u00e9lula. La inmunodetecci\u00f3n, mediante transferencia western, de miocilina en tejidos oculares humanos y bovinos mostr\u00f3 este mismo fragmento c-terminal, indicando que el procesamiento observado en los cultivos celulares es un proceso fisiol\u00f3gico que tambi\u00e9n ocurre en el ojo.    el estudio de la regulaci\u00f3n del procesamiento indic\u00f3 que el bicarbonato presente en el medio de cultivo modula la proporci\u00f3n extracelular de fragmento c-terminal. Este hallazgo puede tener una importante implicaci\u00f3n fisiol\u00f3gica, ya que el bicarbonato es un compuesto abundante en el humor acuoso (20 \u00c2\u00bfmol\/ml) que juega un papel central en la secreci\u00f3n del humor acuoso por el epitelio ciliar.   el estudio de la expresi\u00f3n de formas mutantes de miocilina demostr\u00f3 que \u00e9stas se acumulan intracelularmente y su procesamiento proteol\u00edtico est\u00e1 reducido. La coexpresi\u00f3n de miocilina silvestre con formas mutantes como modelo celular de heterocigosis, dio lugar a un aumento en la secreci\u00f3n de miocilina mutante y a la reducci\u00f3n de la presencia extracelular del fragmento c-terminal de miocilina silvestre. En estos fen\u00f3menos podr\u00eda participar la formaci\u00f3n de hetero-agregados miocilina silvestre\/mutante.   el an\u00e1lisis de las interacciones de miocilina mostr\u00f3 que miocilina forma agregados  covalentes de alto peso molecular consigo misma a trav\u00e9s de puentes disulfuro intermoleculares establecidos por el dominio n-terminal, e interacciona no-covalentemente a trav\u00e9s del extremo c-terminal con otras prote\u00ednas presentes en la matriz extracelular como hevin, sparc, fibronectina y laminina. El procesamiento proteol\u00edtico reduce la afinidad de miocilina por estas prote\u00ednas de matriz y disminuye la cantidad de agregados de miocilina.   en conjunto, estos datos sugieren un posible papel de miocilina y de su procesamiento proteol\u00edtico en la regulaci\u00f3n de la presi\u00f3n intraocular. Las diferencias descritas entre las interacciones moleculares de miocilina completa y su fragmento c-terminal podr\u00edan modificar la resistencia al drenaje de humor acuoso en las v\u00edas trabecular y uveoescleral, modulando as\u00ed la presi\u00f3n intraocular. Adicionalmente, estos datos permiten proponer dos nuevos posibles mecanismos patog\u00e9nicos para las mutaciones en miocilina, mediados por la presencia extracelular de formas mutantes con una posible ganancia de funci\u00f3n y por  la reducci\u00f3n extracelular de fragmento c-terminal silvestre.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Secreci\u00f3n, procesamiento proteol\u00edtico e interacciones moleculares de miocilina: implicaciones en la relaci\u00f3n genotipo-fenotipo en glaucoma<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Secreci\u00f3n, procesamiento proteol\u00edtico e interacciones moleculares de miocilina: implicaciones en la relaci\u00f3n genotipo-fenotipo en glaucoma <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Jos\u00e9 Daniel Aroca Aguilar <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Castilla-la mancha<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 06\/07\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Julio Escribano Martinez<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jos\u00e9 Antonio Fernandez perez <\/li>\n<li>gemma Marfany nadal (vocal)<\/li>\n<li>Miguel Coca prados (vocal)<\/li>\n<li>Jes\u00fas Pintor just (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Jos\u00e9 Daniel Aroca Aguilar Se denomina glaucoma a un conjunto de neuropat\u00edas \u00f3pticas que producen una p\u00e9rdida 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