{"id":96588,"date":"2018-03-11T10:16:52","date_gmt":"2018-03-11T10:16:52","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/caracterizacion-y-regulacion-de-la-chaperona-de-cobre-para-la-cuzn-superoxido-dismutasa-cloroplastica-de-soja\/"},"modified":"2018-03-11T10:16:52","modified_gmt":"2018-03-11T10:16:52","slug":"caracterizacion-y-regulacion-de-la-chaperona-de-cobre-para-la-cuzn-superoxido-dismutasa-cloroplastica-de-soja","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/proteinas\/caracterizacion-y-regulacion-de-la-chaperona-de-cobre-para-la-cuzn-superoxido-dismutasa-cloroplastica-de-soja\/","title":{"rendered":"Caracterizaci\u00f3n y regulaci\u00f3n de la chaperona de cobre para la cuzn super\u00f3xido dismutasa cloropl\u00e1stica de soja"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Sara Sagasti Escalona <\/strong><\/h2>\n<p>La chaperona de cobre para la cuzn super\u00f3xido dismutasa (ccs) pertenece a una nueva clase de prote\u00ednas eucari\u00f3ticas y solubles. Su funci\u00f3n es liberar cu+ a la cuzn super\u00f3xido dismutasa (cuznsod). La cuznsod cloropl\u00e1stica (csd2) es una enzima antioxidante capaz de eliminar los radicales super\u00f3xido generados durante el transporte electr\u00f3nico fotosint\u00e9tico. En arabidopsis se ha descrito que la localizaci\u00f3n de ccs es dual, citos\u00f3lica y cloropl\u00e1stica. Esto es debido a que dentro del marco de lectura de este gen existen dos atgs que generan dos sitios de inicio de la transcripci\u00f3n. En plantas han sido identificadas las ccs de arabidopsis, tomate, patata y ma\u00edz. La estructura de ccs consiste en tres dominios diferentes; un dominio central hom\u00f3logo a la cuznsod flanqueado por los dominios uno y tres, los cuales contienen motivos conservados de uni\u00f3n a metal. Recientemente se ha demostrado la existencia de dos \u00e1tomos de cu y un \u00e1tomo de zn por prote\u00edna, as\u00ed como un cluster de cobre responsable de la formaci\u00f3n de d\u00edmeros o tetr\u00e1meros. \ten este trabajo se ha estudiado la regulaci\u00f3n de la expresi\u00f3n de los genes gmcsd2 y gmccs en suspensiones celulares fotosint\u00e9ticas y planta entera de soja (glycine max) tanto en condiciones control como en exceso de cobre (10\u00c2\u00b5m cuso4). El gen gmccs est\u00e1 regulado por un mecanismo de splicing alternativo con retenci\u00f3n de intr\u00f3n que genera 4 transcritos (gmccs, nsp-gmccs1, nsp-gmccs2 y nsp-gmccs3) en suspensiones celulares y 3 transcritos (gmccs, nsp-gmccs2 y nsp-gmccs3) en planta entera de soja. Estos transcritos se expresaron en todos los tejidos analizados: hoja joven, hoja madura, tallo, ra\u00edz y flor. La expresi\u00f3n del gen se induce fuertemente en respuesta al exceso de cu en el medio. El gen gmcsd2 est\u00e1 regulado por un mecanismo de splicing alternativo con retenci\u00f3n de intr\u00f3n que genera 2 transcritos (gmcsd2 y nsp-gmcsd2), tanto en suspensiones celulares como en planta entera de soja. Estos transcritos se expresaron en todos los tejidos analizados: hoja joven, hoja madura, tallo, ra\u00edz y flor. La expresi\u00f3n del gen se induce fuertemente en respuesta al exceso de cu en el medio. \ta nivel de prote\u00edna, la expresi\u00f3n de gmccs se mantiene constante en respuesta al exceso de cu. La chaperona se encuentra formando mayoritariamente estructura oligom\u00e9rica en forma posiblemente de tr\u00edmeros, aunque la forma monom\u00e9rica y nsp-gmccs3 tambi\u00e9n se detectan en suspensiones celulares y planta entera de soja. El tr\u00edmero se localiza tanto en el estroma como en el tilacoide y es estable incluso hirviendo en condiciones desnaturalizantes, mientras que las otras dos formas se encuentran \u00fanicamente en el estroma. La expresi\u00f3n de la enzima gmcuznsod es indetectable en las suspensiones celulares y plantas de soja crecidas en condiciones control pero su expresi\u00f3n se induce fuertemente en respuesta al exceso de cu. Se han detectado tres isoformas de la gmcuznsod cloropl\u00e1stica que se localizan tanto en el estroma como en la membrana tilacoidal. \tse ha purificado la prote\u00edna recombinante gmccs de suspensiones celulares de soja con un alto grado de pureza. La preparaci\u00f3n es una mezcla de la prote\u00edna con y sin el p\u00e9ptido se\u00f1al, posiblemente digerido por las propias proteasas end\u00f3genas de la bacteria recombinante. La prote\u00edna gmccs recombinante pura se obtiene como apo y es activa ya que se ha demostrado que une dos moles del i\u00f3n cu+ y un mol del i\u00f3n zn2+ por mol de prote\u00edna. La chaperona presenta un sitio con alta afinidad y otro con menor afinidad de uni\u00f3n a cu+, adem\u00e1s posee un sitio de uni\u00f3n a zn2+ de menor afinidad que los del cu+. No se observaron cambios significativos en su estructura secundaria por efecto del cu, lo que indica que se purifica en forma plegada. \tse ha buscado sin \u00e9xito la hipot\u00e9tica cpccs que transporta cu desde hma6 (envuelta) hasta hma8 (tilacoide) en soja.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Caracterizaci\u00f3n y regulaci\u00f3n de la chaperona de cobre para la cuzn super\u00f3xido dismutasa cloropl\u00e1stica de soja<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Caracterizaci\u00f3n y regulaci\u00f3n de la chaperona de cobre para la cuzn super\u00f3xido dismutasa cloropl\u00e1stica de soja <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Sara Sagasti Escalona <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Zaragoza<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 16\/10\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Rafael Picorel Casta\u00f1o<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Carlos G\u00f3mez-moreno calera <\/li>\n<li>salom\u00e9 Prat mongui\u00f3 (vocal)<\/li>\n<li>matilde Bar\u00f3n ayala (vocal)<\/li>\n<li>lola Pe\u00f1arrubia blasco (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Sara Sagasti Escalona La chaperona de cobre para la cuzn super\u00f3xido dismutasa (ccs) pertenece a una nueva 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