{"id":96726,"date":"2018-03-11T10:17:03","date_gmt":"2018-03-11T10:17:03","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/efecto-de-un-envejecimiento-post-ovulatorio-in-vitro-de-ovocitos-de-raton-en-presencia-de-ditiotreitol-sobre-ovocitos-y-embriones-preimplantatorios\/"},"modified":"2018-03-11T10:17:03","modified_gmt":"2018-03-11T10:17:03","slug":"efecto-de-un-envejecimiento-post-ovulatorio-in-vitro-de-ovocitos-de-raton-en-presencia-de-ditiotreitol-sobre-ovocitos-y-embriones-preimplantatorios","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/biologia-celular\/efecto-de-un-envejecimiento-post-ovulatorio-in-vitro-de-ovocitos-de-raton-en-presencia-de-ditiotreitol-sobre-ovocitos-y-embriones-preimplantatorios\/","title":{"rendered":"Efecto de un envejecimiento post-ovulatorio in vitro de ovocitos de rat\u00f3n en presencia de ditiotreitol sobre ovocitos y embriones preimplantatorios"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Francisco Rausell Palam\u00f3s <\/strong><\/h2>\n<p>Objetivo: analizar el efecto del envejecimiento post-ovulatorio de ovocitos de rat\u00f3n in vitro en presencia de diferentes concentraciones de ditiotreitol (dtt) sobre (1) fecundaci\u00f3n y desarrollo embrionario hasta la fase de blastocisto; (2) niveles relativos de actividad glutati\u00f3n s-transferasas (gsts) y tioles, incluyendo glutati\u00f3n reducido (gsh), en ovocitos; (3) niveles de actividad del factor promotor de la metafase (mpf) y protein-kinasas activada por agentes mitog\u00e9nicos (mapks) en ovocitos; (4) activaci\u00f3n partenogen\u00e9tica de ovocitos; (5) asignaci\u00f3n celular al linaje de la masa celular interna (icm) y trofectodermo (te) en blastocistos; y (6) fragmentaci\u00f3n del adn en blastocistos.  material y m\u00e9todos: los ovocitos ovulados por hembras h\u00edbridas de rat\u00f3n, de 7 a 9 semanas de edad, estimuladas con gonadotrofinas ex\u00f3genas se envejecieron en presencia de 0, 5, 50 y 500 mm de dtt durante 6 \u00f3 9 h antes de la inseminaci\u00f3n in vitro, determinaci\u00f3n de los niveles relativos de gsts y tioles, y actividad mpf y mapks, o estimulaci\u00f3n partenogen\u00e9tica con etanol, timerosal+dtt o roscovitina. Los niveles relativos de actividad gsts y tioles en ovocitos se evaluaron mediante t\u00e9cnicas de microscop\u00eda confocal. Los niveles relativos de actividad mpf y mapks se determinaron mediante electroforesis de gel de poliacrilamida (sds-page). Los embriones resultantes de la fecundaci\u00f3n in vitro se cultivaron hasta la fase de blastocisto. La asignaci\u00f3n celular a la masa celular interna o al trofectodermo y fragmentaci\u00f3n de adn en blastocistos se evalu\u00f3 utilizando t\u00e9cnicas de epifluorescencia. resultados: el porcentaje de fecundaci\u00f3n fue significativamente mayor en ovocitos incubados en presencia de 50 y 500 mm de dtt en comparaci\u00f3n con los ovocitos expuestos a 0 y 5 mm de dtt. El envejecimiento de los ovocitos en presencia de 50 y 500 mm de dtt tambi\u00e9n tuvo efectos beneficiosos en el posterior desarrollo embrionario hasta la fase de blastocisto. El tratamiento de los ovocitos con 5, 50 y 500 mm de dtt contrarrest\u00f3 la ca\u00edda de los niveles de actividad gsts y tioles asociada con el envejecimiento post-ovulatorio de los ovocitos. Los ovocitos envejecidos durante 9 h en presencia de 500 mm de dtt mostraron una mayor actividad mpf que los ovocitos incubados durante el mismo per\u00edodo en 0 y 5 mm de dtt. Los niveles de actividad mapks fueron significativamente menores en el grupo de 5 mm de dtt en comparaci\u00f3n con los ovocitos frescos incubados durante 1 h en ausencia de dtt y los ovocitos envejecidos durante 9 h en presencia de 50 mm de dtt. En el grupo de ovocitos controles, no tratados, y el grupo de ovocitos tratados con roscovitina no se encontraron diferencias significativas en el porcentaje de activaci\u00f3n partenogen\u00e9tica entre ovocitos incubados durante 1 h en ausencia de dtt \u00f3 9 h en presencia de 0, 5, 50 or 500 mm dtt. En los grupos de ovocitos expuestos a etanol \u00f3 timerosal+dtt, los ovocitos frescos mostraron un menor porcentaje de activaci\u00f3n partenogen\u00e9tica que los ovocitos envejecidos in vitro en 0, 5, 50 y 500 mm de dtt. Los ovocitos envejecidos in vitro en presencia de 500 mm de dtt mostraron un porcentaje significativamente mayor de activaci\u00f3n partenogen\u00e9tica que los ovocitos envejecidos en 0, 5 y 50 mm de dtt. El envejecimiento de los ovocitos en presencia de 50 y 500 mm de dtt aument\u00f3 significativamente el n\u00famero total de c\u00e9lulas en blastocistos comparado con el grupo de 0 mm de dtt. El tratamiento de los ovocitos con 5, 50 y 500 mm de dtt disminuy\u00f3 significantemente el cociente entre n\u00famero de n\u00facleos con fragmentaci\u00f3n del adn y n\u00famero de c\u00e9lulas de la icm cuando se compar\u00f3 con el grupo de 0 mm de dtt. El n\u00famero de c\u00e9lulas de la icm y el cociente icm\/te en blastocistos fue significativamente mayor en los grupos de 50  y 500 mm de dtt que en el grupo de 0 mm de dtt. conclusiones: el envejecimiento post-ovulatorio de ovocitos de rat\u00f3n in vitro en presencia de dtt se asocia con (1) mayores porcentajes de fecundaci\u00f3n y desarrollo embrionario hasta el estadio de blastocisto; (2) mayores niveles relativos de actividad gsts y tioles, incluyendo gsh, en ovocitos; (3) mayores niveles de actividad mpf y mapks en ovocitos; (4) ausencia de efecto sobre el potencial de activaci\u00f3n partenogen\u00e9tica tras exposici\u00f3n a etanol o roscovitina, o mayor susceptibilidad tras tratamiento con timerosal+dtt; (5) mayor n\u00famero de c\u00e9lulas de la icm y cociente entre n\u00famero de c\u00e9lulas de la icm y te en blastocistos; y (6) mayor porcentaje de n\u00facleos con fragmentaci\u00f3n del adn en la icm en blastocistos.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Efecto de un envejecimiento post-ovulatorio in vitro de ovocitos de rat\u00f3n en presencia de ditiotreitol sobre ovocitos y embriones preimplantatorios<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Efecto de un envejecimiento post-ovulatorio in vitro de ovocitos de rat\u00f3n en presencia de ditiotreitol sobre ovocitos y embriones preimplantatorios <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Francisco Rausell Palam\u00f3s <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Universitat de val\u00e9ncia (estudi general)<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 23\/10\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Juan  Jos\u00e9 Tar\u00edn Folgado<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Antonio Cano s\u00e1nchez <\/li>\n<li>Manuel Aviles sanchez (vocal)<\/li>\n<li>Jorge Ten morro (vocal)<\/li>\n<li>Fernando Garc\u00eda xim\u00e9nez (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Francisco Rausell Palam\u00f3s Objetivo: analizar el efecto del envejecimiento post-ovulatorio de ovocitos de rat\u00f3n in vitro en 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