{"id":96825,"date":"2018-03-11T10:17:12","date_gmt":"2018-03-11T10:17:12","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/estudio-estructural-y-funcional-del-arnp-del-virus-de-la-gripe\/"},"modified":"2018-03-11T10:17:12","modified_gmt":"2018-03-11T10:17:12","slug":"estudio-estructural-y-funcional-del-arnp-del-virus-de-la-gripe","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/estudio-estructural-y-funcional-del-arnp-del-virus-de-la-gripe\/","title":{"rendered":"Estudio estructural y funcional del arnp del virus de la gripe"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Rocio Coloma Ciudad <\/strong><\/h2>\n<p>Summary 21 introducci\u00f3n 23 el virus de la gripe 25 1. Historia 2. Clasificaci\u00f3n y nomenclatura 3. La part\u00edcula viral &#8211; prote\u00ednas virales 4. Rnas virales la ribonucleoprote\u00edna del virus de la gripe 29 1. La polimerasa viral &#8211; pb pb 1 &#8211; pb pb 2 &#8211; pa pa 2. La nucleoprote\u00edna ciclo de infecci\u00f3n viral 35 1. Entrada de las part\u00edculas virales 2 . Transcripci\u00f3n, replicaci\u00f3n y expresi\u00f3n g\u00e9nica 3 . Procesamiento de los rnas virales y s\u00edntesis de prote\u00ednas 4 . Formaci\u00f3n y salida de nuevas part\u00edculas virales procesos de replicaci\u00f3n y transcripci\u00f3n del virus de la gripe 38 1. Transcripci\u00f3n viral 2 . Replicaci\u00f3n viral factores celulares asociados a las rnps 40 estudio estructural de maquinarias de replicaci\u00f3n 41 1. Abordajes tridimensionales 2 . Requerimientos 3 . De la observaci\u00f3n al microscopio a la obtenci\u00f3n de un m odelo 3d &#8211; el procesamiento de la imagen &#8211; a n\u00e1lisis bidimensional &#8211; r econstrucci\u00f3n tridimensional de part\u00edculas in dividuales objetivos 47 materiales y m\u00e9todos 51 materiales 53 1 . L\u00edneas celulares 2 . Bacterias 3 . Virus 4 . Pl\u00e1smidos 5 . Anticuerpos 6 . Resinas de cromatograf\u00eda m\u00e9todos 53 manipulaci\u00f3n del dna y clonajes 1. Construcci\u00f3n del pl\u00e1smido pcmv cmv pb pb 2-his is 2 . Construcci\u00f3n del pl\u00e1smido phh clon 23 3 . Mutantes de np np generaci\u00f3n y titulaci\u00f3n de vtf7-3 1. Generaci\u00f3n de stocks de virus 2 . Titulaci\u00f3n mediante ensayo en placa manipulaci\u00f3n de cultivos celulares 1. Reconstituci\u00f3n de rnp rnp rnp s in vivo 1.1 para an\u00e1lisis estructural 1.2 para ensayos de complementaci\u00f3n 2. Reconstituci\u00f3n de polimerasa in vivo 3 . Expresi\u00f3n de nucleoprote\u00edna 4 . Obtenci\u00f3n de extractos celulares purificaci\u00f3n de rnps paso1. Purificaci\u00f3n de rnp rnp rnp s por cromatograf\u00eda de a finidad p p p aso 2. Purificaci\u00f3n de rnp rnp rnp s por cromatograf\u00eda de e xclusi\u00f3n molecular p p p aso 3. Concentraci\u00f3n de rnp rnp rnp s por cromatograf\u00eda d e afinidad an\u00e1lisis de prote\u00ednas 1 . Western blot 2 . Tinci\u00f3n de geles y membranas 3 . Determinaci\u00f3n de prote\u00edna cat cat cat 4 . Purificaci\u00f3n de olig\u00f3meros de nucleoprote\u00edna por cromatograf\u00eda de exclusi\u00f3n molecular manipulaci\u00f3n del rna 1 . Transcripci\u00f3n in vitro de las rnp rnp rnp s 2 . Digesti\u00f3n controlada del rna rna rna 3 . Marcaje del rna rna rna microscop\u00eda 1 . Tinci\u00f3n negativa 2 . Criomicroscop\u00eda electr\u00f3nica 3 . Digitalizaci\u00f3n y procesamiento de im\u00e1genes 4 . Docking resultados 63 determinaci\u00f3n de la estructura tridimensional de la rnp recombinante del virus de la gripe 65 1. Generaci\u00f3n de rnps recombinantes 1 .1 reconstituci\u00f3n de rnp rnp rnp s 1.1.1 l\u00edneas celulares, pl\u00e1smidos y reactivos de transfecci\u00f3n 1.1.2 reconstituci\u00f3n est\u00e1ndar 1 .2 purificaci\u00f3n de rnp rnp rnp s 1.2.1 selecci\u00f3n y optimizaci\u00f3n de los m\u00e9todos y tampones de purificaci\u00f3n 1.2.2 purificaci\u00f3n est\u00e1ndar 2. An\u00e1lisis estructural de la rnp recombinante 2 .1 modelo de la rnp rnp rnp por me me de muestras te\u00f1idas 2 .2 estructura de la rnp rnp rnp por criomicroscop\u00eda electr\u00f3nica 2 .3 localizaci\u00f3n de las subunidades en la estructura del complejo de la polimerasa 2 .4 docking de la estructura at\u00f3mica de la np np en el a nillo de np np 2 .5 estudio de la localizaci\u00f3n del rna rna rna en la rnp rnp rnp del v irus de la gripe an\u00e1lisis funcional de la rnp del virus de la gripe 76 1. Mutantes de np en la zona de interacci\u00f3n np-np 2 . Mutantes de np en la zona de interacci\u00f3n np -polimerasa an\u00e1lisis estructural y funcional del proceso de transcripci\u00f3n 81 1. An\u00e1lisis estructural del proceso de transcripci\u00f3n 2 . An\u00e1lisis gen\u00e9tico del proceso de transcripci\u00f3n discusi\u00f3n 89 1. An\u00e1lisis estructural de la rnp 91 1.1 la estructura de la rnp 1 .2 el anillo de np 1 .3 la posici\u00f3n del rna 1 .4 estructura de la polimerasa y localizaci\u00f3n d e los dominios de las subunidades 1 .5 resumen final de la estructura de la rnp 2. Nuevo modelo de transcripci\u00f3n viral 97 2.1 estudio del proceso de transcripci\u00f3n 2 .2 \u00c2\u00bfpuede una rnp silvestre complementar a otra r np defectiva en transcripci\u00f3n? 2 .3\u00c2\u00bfpuede una polimerasa soluble incrementar la tr anscripci\u00f3n de una rnp? 2 .4 nuevo modelo de transcripci\u00f3n viral 2 .5 el nuevo modelo de transcripci\u00f3n en cis en el c ontexto de la infecci\u00f3n viral conclusiones 105 bibliograf\u00eda 109 anexo 131<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Estudio estructural y funcional del arnp del virus de la gripe<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Estudio estructural y funcional del arnp del virus de la gripe <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Rocio Coloma Ciudad <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Aut\u00f3noma de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 27\/10\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>benito Romero Mart\u00edn<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Juan  Antonio Garcia alvarez <\/li>\n<li>mauricio Garcia mateu (vocal)<\/li>\n<li>Jos\u00e9 Antonio Melero fondevilla (vocal)<\/li>\n<li>Mar\u00eda pilar P\u00e9rez bre\u00f1a (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Rocio Coloma Ciudad Summary 21 introducci\u00f3n 23 el virus de la gripe 25 1. 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