{"id":96976,"date":"2009-03-11T00:00:00","date_gmt":"2009-03-11T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/analisis-de-la-formacion-de-cloroanisoles-por-trichoderma-longibrachiatum-caracterizacion-del-gen-codificante-del-enzima-clorofenol-o-metiltransferasa-cpomt\/"},"modified":"2009-03-11T00:00:00","modified_gmt":"2009-03-11T00:00:00","slug":"analisis-de-la-formacion-de-cloroanisoles-por-trichoderma-longibrachiatum-caracterizacion-del-gen-codificante-del-enzima-clorofenol-o-metiltransferasa-cpomt","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/vino\/analisis-de-la-formacion-de-cloroanisoles-por-trichoderma-longibrachiatum-caracterizacion-del-gen-codificante-del-enzima-clorofenol-o-metiltransferasa-cpomt\/","title":{"rendered":"An\u00e1lisis de la formaci\u00f3n de cloroanisoles por trichoderma longibrachiatum: caracterizaci\u00f3n del gen codificante del enzima clorofenol o-metiltransferasa (cpomt)"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Ra\u00fal Feltrer Mart\u00ednez <\/strong><\/h2>\n<p>En este trabajo se han desarrollado t\u00e9cnicas biotecnol\u00f3gicas para combatir el problema del cork taint. El  cork taint, o contaminaci\u00f3n del vino por corcho, consiste en la aparici\u00f3n en el tap\u00f3n de una serie de metabolitos microbianos que al pasar al vino le confieren unos olores y\/o sabores desagradables que arruinan sus propiedades organol\u00e9pticas naturales e impiden su comercializaci\u00f3n.   los clorofenoles son compuestos qu\u00edmicos que han sido ampliamente utilizados como fungicidas y pesticidas. Como resultado de su uso muchos ecosistemas se encuentran contaminados, pudiendo estos compuestos ser absorbidos por las plantas, incluida la corteza de los alcornoques. Los hongos filamentosos que viven sobre ella se defienden metilando los clorofenoles para transformarlos en cloroanisoles de menor toxicidad. Este hecho presenta gran relevancia ya que entre los compuestos responsables del cork taint, los m\u00e1s importantes son los cloroanisoles y especialmente el 2,4,6-tricloroanisol (2,4,6-tca), habi\u00e9ndose demostrado que la aparici\u00f3n de este compuesto es debida a la biometilaci\u00f3n directa a partir del 2,4,6-triclorofenol (2,4,6-tcp).  en este trabajo se ha purificado por primera vez un enzima clorofenol o-metiltransferasa (cpomt) responsable de esta metilaci\u00f3n en el hongo filamentoso aislado del corcho trichoderma longibrachiatum. Posteriormente se procedi\u00f3 a la secuenciaci\u00f3n de p\u00e9ptidos internos por maldi-tof\/tof y esi-it y, a partir de la secuencia de estos p\u00e9ptidos, al dise\u00f1o de cebadores con los que se logr\u00f3 clonar el gen cpomt de 1637 pb con la presencia de 4 intrones y que codificaba una prote\u00edna de 468 amino\u00e1cidos. Este gen fue silenciado mediante arn cortos de interferencia dando lugar a una cepa que presentaba un decrecimiento del 40% en la actividad cpomt con respecto a la cepa silvestre y una disminuci\u00f3n en la formaci\u00f3n de 2,4,6-tcp en medio l\u00edquido de un 53%. As\u00ed pues se confirmaba que este gen es responsable directo de la aparici\u00f3n de 2,4,6-tca en el corcho y que por tanto su atenuaci\u00f3n daba lugar a un descenso dr\u00e1stico en la producci\u00f3n de 2,4,6-tca por el hongo.   por otra parte se abord\u00f3 la expresi\u00f3n heter\u00f3loga del gen pel3 de pleurotus eryngii en t. Longibrachiatum. Dicho gen codifica un enzima lacasa capaz de oxidar numerosos compuestos arom\u00e1ticos provenientes de la degradaci\u00f3n de la lignina. La expresi\u00f3n de este gen en t. Longibrachiatum (aunque lograda de manera poco eficiente) dio lugar a una cepa que al crecer sobre corcho granulado contaminado con 2,4,6-tcp produc\u00eda un descenso en las concentraciones de 2,4,6-tca y 2,4,6-tcp de entorno al 20% con respecto a los encontrados en los cultivos de la cepa silvestre. Estos valores indican que unos mayores niveles de la expresi\u00f3n de la actividad lacasa en t. Longibrachiatum podr\u00edan dar lugar a un descenso considerable en la cantidad de 2,4,6-tca presente en el corcho.  por tanto estas dos t\u00e9cnicas se presentan como la base de una prometedora estrategia biotecnol\u00f3gica a desarrollar en el futuro frente al cork taint y que podr\u00eda conseguir paliar las p\u00e9rdidas econ\u00f3micas para bodegueros y fabricantes de tapones de corcho afectados por este problema.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>An\u00e1lisis de la formaci\u00f3n de cloroanisoles por trichoderma longibrachiatum: caracterizaci\u00f3n del gen codificante del enzima clorofenol o-metiltransferasa (cpomt)<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 An\u00e1lisis de la formaci\u00f3n de cloroanisoles por trichoderma longibrachiatum: caracterizaci\u00f3n del gen codificante del enzima clorofenol o-metiltransferasa (cpomt) <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Ra\u00fal Feltrer Mart\u00ednez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Le\u00f3n<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 03\/11\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Juan  Jos\u00e9 Rubio Coque<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Jes\u00fas manuel Cantoral fern\u00e1ndez <\/li>\n<li>Carlos Barreiro m\u00e9ndez (vocal)<\/li>\n<li>ramiro pedro Godio fern\u00e1ndez (vocal)<\/li>\n<li>Ana G\u00f3mez rodr\u00edguez (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Ra\u00fal Feltrer Mart\u00ednez En este trabajo se han desarrollado t\u00e9cnicas biotecnol\u00f3gicas para combatir el problema del cork 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