{"id":97048,"date":"2009-06-11T00:00:00","date_gmt":"2009-06-11T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/expresion-de-los-receptores-glutamatergicos-de-nmda-y-ampa-tras-la-isquemia-cerebral-efecto-de-la-privacion-de-oxa%c2%adgeno-y-glucosa-sobre-la-expresion-del-receptor-de-nmda\/"},"modified":"2009-06-11T00:00:00","modified_gmt":"2009-06-11T00:00:00","slug":"expresion-de-los-receptores-glutamatergicos-de-nmda-y-ampa-tras-la-isquemia-cerebral-efecto-de-la-privacion-de-oxa%c2%adgeno-y-glucosa-sobre-la-expresion-del-receptor-de-nmda","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/biologia-celular\/expresion-de-los-receptores-glutamatergicos-de-nmda-y-ampa-tras-la-isquemia-cerebral-efecto-de-la-privacion-de-oxa%c2%adgeno-y-glucosa-sobre-la-expresion-del-receptor-de-nmda\/","title":{"rendered":"Expresi\u00f3n de los receptores glutamat\u00e9rgicos de nmda y ampa tras la isquemia cerebral. efecto de la privaci\u00f3n de ox\u00edgeno y glucosa sobre la expresi\u00f3n del receptor de nmda"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Severiano Dos Anjos  Vilaboa <\/strong><\/h2>\n<p>La isquemia cerebral es una de las principales causas de muerte y discapacidad en los pa\u00edses industrializados y ocasiona un gran costo socioecon\u00f3mico a la sociedad. Uno de los factores importantes que afectan la muerte neuronal promovida tras el da\u00f1o isqu\u00e9mico es la sobreactivaci\u00f3n de receptores glutamat\u00e9rgicos debida al aumento de glutamato en el espacio extracelular durante el proceso isqu\u00e9mico. Esta sobreexcitaci\u00f3n da lugar a un gran incremento del calcio intracelular, que activa v\u00edas intracelulares que finalmente promueven la muerte neuronal.  en esta memoria se describe la expresi\u00f3n de los receptores ionotr\u00f3picos de glutamato de nmda y ampa a trav\u00e9s de distintos modelos experimentales, lo cual contribuye al conocimiento de los mecanismos implicados en el da\u00f1o cerebral y la vulnerabilidad regional promovidos por isquemia\/reperfusi\u00f3n (i\/r) y ogd (privaci\u00f3n de ox\u00edgeno y glucosa). Los ensayos i\/r in vivo se llevaron a cabo usando un modelo de isquemia global transitoria en rata. El estudio de ogd se realiz\u00f3 en ensayos ex vivo usando secciones hipocampales. Para ello se ha cuantificado la expresi\u00f3n de las distintas subunidades que componen los receptores de nmda (nr1, nr2a y nr2b) y ampa (glur1 y glur2) en distintas estructuras cerebrales de cerebro de rata, a nivel de arnm y de prote\u00edna, a trav\u00e9s de las t\u00e9cnicas de pcr en tiempo real y western blot respectivamente. Asimismo, se han cuantificado los niveles del marcador de microglia activada cd11b\/cd18 (mac-1) mediante t\u00e9cnicas de pcr en tiempo real e inmunohistoqu\u00edmica como medida de la respuesta inflamatoria observada tras i\/r in vivo.   los ensayos in vivo mostraron un descenso significativo en los niveles de arnm de las subunidades nr1, nr2a y nr2b del receptor de nmda, as\u00ed como de las subunidades glur1 y glur2 del receptor de ampa en todas las estructuras cerebrales estudiadas (corteza cerebral, caudado-putamen y \u00e1reas hipocampales) despu\u00e9s de 48 horas de reperfusi\u00f3n tras el proceso isqu\u00e9mico. Sin embargo, el nivel de descenso es distinto entre las diferentes \u00e1reas cerebrales estudiadas, mostrando principalmente niveles de arnm m\u00e1s altos la corteza cerebral que las \u00e1reas hipocampales. Se observaron tambi\u00e9n descensos significativos en los niveles de prote\u00edna a trav\u00e9s de los ensayos de western blot. En contraposici\u00f3n a los resultados anteriores, se obtuvieron incrementos significativos en los niveles de arnm y prote\u00edna del marcador cd11b\/cd18 en estas condiciones (dos-anjos et al., 2009a, b).  los ensayos ex vivo para cuantificar niveles de arnm fueron caracterizados inicialmente analizando el efecto del tiempo, la temperatura de incubaci\u00f3n y distintos medios de incubaci\u00f3n sobre la expresi\u00f3n de genes de referencia (gapdh, mast2 y \u00edY-actina). Esto permiti\u00f3 definir una ventana de trabajo de 6 horas tras el sacrificio del animal, en la cual los niveles de arnm se mantienen estables en una soluci\u00f3n tamponada de sales de ringer a una temperatura de 25\u00c2\u00bac. El resto de condiciones no dieron lugar a modelos estables (dos-anjos et al., 2008). Usando este modelo, las secciones hipocampales fueron sometidas durante 30 minutos a condiciones de ogd, lo cual dio lugar a un descenso significativo en los niveles de arnm de las subunidades nr1, nr2a y nr2b del receptor de nmda, as\u00ed como del factor de transcripci\u00f3n c-fos. Despu\u00e9s de 3 horas de reperfusi\u00f3n se observaron aumentos de los niveles de arnm, especialmente para el gen c-fos. Se obtuvieron resultados similares en ausencia de calcio extracelular, lo cual descarta que este i\u00f3n sea el factor desencadenante de los cambios observados en los niveles de arnm tras la ogd. Los niveles de arnm de las subunidades del receptor de nmda no se modificaron en ensayos en presencia de glutamato, a concentraciones similares a las que se producen durante la ogd, lo que indica que el aumento de glutamato no es la \u00fanica causa responsable de los descensos encontrados tras la ogd. La presencia de antagonistas de los receptores de nmda y de ampa\/kainato en el medio de incubaci\u00f3n originaron descensos similares  en los niveles de arnm de las subunidades del receptor de nmda a los que ocurren durante la ogd, sin embargo no se observaron descensos adicionales durante la ogd (dos-anjos et al., 2009c, ).  bibliograf\u00eda  dos-anjos s, mart\u00ednez-villayandre b, montori s, salas a, p\u00e9rez-garc\u00eda cc, fern\u00e1ndez-l\u00f3pez a. 2008. Quantitative gene expression analysis in a brain slice model: influence of temperature and incubation media. Anal biochem. 378(1):99-101.  dos-anjos s, mart\u00ednez-villayandre b, montori s, regueiro-purri\u00f1os mm, gonzalo-orden jm, fern\u00e1ndez-l\u00f3pez a. 2009a. Transient global ischemia in rat brain promotes different nmda receptor regulation depending on the brain structure studied. Neurochem int. 54(3-4):180-5.   dos-anjos s, mart\u00ednez-villayandre b, montori s, regueiro-purri\u00f1os mm, gonzalo-orden jm, fern\u00e1ndez-l\u00f3pez a. 2009b. Global ischemia-induced modifications in the expression of ampa receptors and inflammation in rat brain. Brain res. 1287:20-7.  dos-anjos s, mart\u00ednez-villayandre b, montori s, p\u00e9rez-garc\u00eda cc, fern\u00e1ndez-l\u00f3pez a. 2009c. Early modifications in nmdar subunit mrna levels in an oxygen and glucose deprivation model using rat hippocampal brain slices. Neurosci. In press.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Expresi\u00f3n de los receptores glutamat\u00e9rgicos de nmda y ampa tras la isquemia cerebral. efecto de la privaci\u00f3n de ox\u00edgeno y glucosa sobre la expresi\u00f3n del receptor de nmda<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Expresi\u00f3n de los receptores glutamat\u00e9rgicos de nmda y ampa tras la isquemia cerebral. efecto de la privaci\u00f3n de ox\u00edgeno y glucosa sobre la expresi\u00f3n del receptor de nmda <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Severiano Dos Anjos  Vilaboa <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Le\u00f3n<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 06\/11\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Arsenio Fern\u00e1ndez L\u00f3pez<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: pablo vicente Escrib\u00e1 ruiz <\/li>\n<li>diego Ruano caballero (vocal)<\/li>\n<li>christian Thode (vocal)<\/li>\n<li>Javier Vitorica ferr\u00e1ndez (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Severiano Dos Anjos Vilaboa La isquemia cerebral es una de las principales causas de muerte y discapacidad [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[849,4430,40433,4275],"tags":[4583,199035,123925,94577,66276,199034],"class_list":["post-97048","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-biologia-celular","category-leon","category-neurobiologia-molecular","category-neurociencias","tag-arsenio-fernandez-lopez","tag-christian-thode","tag-diego-ruano-caballero","tag-javier-vitorica-ferrandez","tag-pablo-vicente-escriba-ruiz","tag-severiano-dos-anjos-vilaboa"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/97048","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=97048"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/97048\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=97048"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=97048"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=97048"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}