{"id":97129,"date":"2009-10-11T00:00:00","date_gmt":"2009-10-11T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/estudio-del-metabolismo-del-formaldeha%c2%addo-en-pseudomonas-putida-kt2440\/"},"modified":"2009-10-11T00:00:00","modified_gmt":"2009-10-11T00:00:00","slug":"estudio-del-metabolismo-del-formaldeha%c2%addo-en-pseudomonas-putida-kt2440","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica-molecular\/estudio-del-metabolismo-del-formaldeha%c2%addo-en-pseudomonas-putida-kt2440\/","title":{"rendered":"Estudio del metabolismo del formaldeh\u00eddo en pseudomonas putida kt2440"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Amalia Roca Hernandez <\/strong><\/h2>\n<p>El formaldeh\u00eddo es un compuesto t\u00f3xico para todos los seres vivos debido a su alta reactividad con componentes celulares como los \u00e1cidos nucleicos y las prote\u00ednas. El formaldeh\u00eddo se considera un contaminante ubicuo que est\u00e1 presente en el aire y en el agua. Adem\u00e1s dicho compuesto es un subproducto en el metabolismo de la histidina y compuestos naturales metoxilados, y dado su origen biog\u00e9nico los seres vivos han desarrollado diversos mecanismos de detoxificaci\u00f3n de formaldeh\u00eddo. La detoxificaci\u00f3n implica usualmente la acci\u00f3n concreta de distintos sistemas enzim\u00e1ticos entre los que se incluyen formaldeh\u00eddo deshidrogenasas y formato deshidrogenasas que son capaces de degradar el formaldeh\u00eddo a co2. En este trabajo se ha puesto de manifiesto que en p. Putida kt2440 el formaldeh\u00eddo se detoxifica a co2 a trav\u00e9s del sistema formaldeh\u00eddo deshidrogenasa-formato deshidrogenasa. en esta tesis doctoral hemos realizado el primer an\u00e1lisis transcript\u00f3mico de la respuesta de p. Putida kt2440 a concentraciones subletales de formaldeh\u00eddo, hecho que ha ayudado a comprender mejor la respuesta inicial de la cepa a este compuesto qu\u00edmico y a identificar un conjunto de genes implicados en dicha respuesta. Nuestros resultados apoyan que p. Putida es resistente a formaldeh\u00eddo y dicha resistencia parece implicar la detoxificaci\u00f3n mediante la conversi\u00f3n del t\u00f3xico a co2, extrusi\u00f3n de la mol\u00e9cula por medio de la bomba de eflujo mexef-oprn, inducci\u00f3n de enzimas que reparan el adn da\u00f1ado y chaperonas que corrigen a nivel de prote\u00ednas el da\u00f1o directo provocado por el formaldeh\u00eddo o el de sus efectos laterales como los da\u00f1os oxidativos.  hemos analizado la organizaci\u00f3n f\u00edsica y transcripcional de los genes que codifican las formaldeh\u00eddo deshidrogenasas y formato deshidrogenasas en kt2440 observando que kt2440 posee 2 formaldeh\u00eddo deshidrogenasas (pp0328 y pp3970) y dos complejos formato deshidrogenasa (pp0489-pp0492 y pp2183-pp2186). Los promotores de dichos productos g\u00e9nicos son promotores no can\u00f3nicos que se expresan a niveles basales en la fase de crecimiento exponencial y a niveles m\u00e1s altos en la fase estacionaria independientemente de la presencia extracelular de formaldeh\u00eddo o formato. Se han construido mutantes con mutaciones simples o dobles en las formaldeh\u00eddo deshidrogenasas y formato deshidrogenasas y los resultados muestran que dichos productos g\u00e9nicos contribuyen en la mineralizaci\u00f3n de formaldeh\u00eddo y formato. Adem\u00e1s, el doble mutante en las dos formaldeh\u00eddo deshidrogenasas y el doble mutante en las formato deshidrogenasas continuaban oxidando formaldeh\u00eddo a co2, sugiriendo una redundancia de funciones que no s\u00f3lo se limita a los genes anotados. No obstante, las largas fases de latencia presentadas por los mutantes simples y dobles en comparaci\u00f3n con las que presentaba la cepa parental cuando se cultivaban con concentraciones de formaldeh\u00eddo cercanas a las mics sugieren que dichos sistemas de detoxificacion podr\u00edan tener un papel en la tolerancia a concentraciones subletales de formaldeh\u00eddo.   en kt2440 los orfs pp0257 (fdhd) y pp0492 (fmdd) estaban anotadas originalmente como prote\u00ednas accesorias formato deshidrogenasa. Fmdd es adyacente al oper\u00f3n formato deshidrogenasa (pp0489-pp0491), y se transcribe con \u00e9l preferentemente en fase estacionaria. Fdhd no est\u00e1 ligado a las agrupaciones g\u00e9nicas formato deshidrogenasa y, se expresa en la fase estacionaria de crecimiento, aunque su transcripci\u00f3n puede ser mediada por rpod o rpos. El nivel de expresi\u00f3n transcripcional de fdhd se ve incrementado en respuesta a formaldeh\u00eddo o formato o con compuestos qu\u00edmicos que rinden estos compuestos c1 en alg\u00fan paso de su metabolismo. A pesar de estas correlaciones, la inactivaci\u00f3n de pp0257 no produc\u00eda un efecto significativo en la actividad formato deshidrogenasa in vivo, mientras que la inactivaci\u00f3n de pp0492 llevaba a un descenso del 60%. Estos resultados sugieren que la redundancia de funciones en el metabolismo del formaldeh\u00eddo en p putida se extiende hasta las prote\u00ednas implicadas en la maduraci\u00f3n\/localizaci\u00f3n de los complejos formato deshidrogenasa.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Estudio del metabolismo del formaldeh\u00eddo en pseudomonas putida kt2440<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Estudio del metabolismo del formaldeh\u00eddo en pseudomonas putida kt2440 <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Amalia Roca Hernandez <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Granada<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 10\/11\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Juan  Luis Ramos Martin<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: rafael Salto gonzalez <\/li>\n<li>Jos\u00e9 julio Ortega calvo (vocal)<\/li>\n<li>Francisco Murillo  araujo (vocal)<\/li>\n<li>carmen Mich\u00e1n  do\u00f1a (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Amalia Roca Hernandez El formaldeh\u00eddo es un compuesto t\u00f3xico para todos los seres vivos debido a su 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