{"id":97501,"date":"2018-03-11T10:18:03","date_gmt":"2018-03-11T10:18:03","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/evaluacion-del-mecanismo-de-corte-del-rna-por-la-toxina-bacteriana-kid-y-de-su-actividad-inhibidora-de-la-traduccion\/"},"modified":"2018-03-11T10:18:03","modified_gmt":"2018-03-11T10:18:03","slug":"evaluacion-del-mecanismo-de-corte-del-rna-por-la-toxina-bacteriana-kid-y-de-su-actividad-inhibidora-de-la-traduccion","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/evaluacion-del-mecanismo-de-corte-del-rna-por-la-toxina-bacteriana-kid-y-de-su-actividad-inhibidora-de-la-traduccion\/","title":{"rendered":"Evaluaci\u00f3n del mecanismo de corte del rna por la toxina bacteriana kid y de su actividad inhibidora de la traducci\u00f3n."},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Elizabeth Diago Navarro <\/strong><\/h2>\n<p>Null kid, la toxina del sistema de mantenimiento pard (kis, kid) del pl\u00e1smido r1, es una endoribonucleasa de baja especificidad y un inhibidor de s\u00edntesis de prote\u00ednas. Kid corta el arn con preferencia, a 5\u00c2\u00bf de la primera a en la secuencia 5\u00c2\u00bf-ua(a\/c)-3\u00c2\u00bf. Se ha propuesto que la actividad arnasa de kid es similar al de las arnasas a y t1. El mecanismo se ha establecido en base al an\u00e1lisis de los productos de corte del arn y de una estructura modelada de un complejo de la toxina kid con el substrato 5\u00c2\u00bf- aduaca-3\u00c2\u00bf. Se supone que la inhibici\u00f3n de la s\u00edntesis de prote\u00ednas por kid se debe a la rotura del arnm y que \u00e9sta, ocurre de una manera independiente de la traducci\u00f3n.  en esta tesis se ha realizado una evaluaci\u00f3n del modelo de rotura del arn por ki d. Esta evaluaci\u00f3n se ha llevado a cabo analizando por espectrometr\u00eda de masas, la uni\u00f3n y rotura del substrato, de prote\u00ednas con mutaciones en residuos claves del modelo. Las mutaciones r73h, d75e, d75n y h17p, que afectan a residuos del centro cata l\u00edtico propuesto, inactivan la toxicidad de la prote\u00edna. Ensayos de corte realizados con los sustratos 5\u00c2\u00bf-auaca-3\u00c2\u00bf y 5\u00c2\u00bf-uuacu-3\u00c2\u00bf, indican que las mutaciones anulan la actividad arnasa de la toxina sin afectar a su capacidad de uni\u00f3n al sustrato 5\u00c2\u00bf-ad uaca-3\u00c2\u00bf.  el modelo tambi\u00e9n propone la existencia de dos superficies sim\u00e9tricas de uni\u00f3n a arn en el d\u00edmero de la toxina, e identifica residuos implicados en la uni\u00f3n general del sustrato, como r85, o en interacciones espec\u00edficas con las bases de la secuencia consenso 5\u00c2\u00bf-ua(a\/c)-3\u00c2\u00bf, como a55, t46 y t69. Esta propuesta se ha evaluado analizando la interacci\u00f3n con el arn y la actividad arnasa de variantes de kid con mutaciones en dichos residuos. El an\u00e1lisis indic\u00f3 que los mutantes interaccionaban  con el substrato con menor eficiencia que la prote\u00edna silvestre. Las mutaciones a55g y t69g, mostraron una actividad arnasa reducida pero medible, sin embargo, inesperadamente,  la mutaci\u00f3n t46g inhibi\u00f3 completamente el corte del substrato. La prote \u00edna kidr85w mostr\u00f3 una reducci\u00f3n m\u00e1s dr\u00e1stica que las prote\u00ednas mutantes kida55g y kidt69g en su uni\u00f3n a arn y en su actividad arnasa. Los mutantes que reten\u00edan actividad arnasa, mostraron, tambi\u00e9n, inhibici\u00f3n de la s\u00edntesis de prote\u00ednas in vitro y d e la toxicidad in vivo. Los resultados apoyan el modelo propuesto e indican que t46 es un residuo de uni\u00f3n a arn que participa m\u00e1s directamente en la actividad arnasa de la toxina. el descubrimiento accidental de mutaciones en el gen prfa, abri\u00f3 la p<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Evaluaci\u00f3n del mecanismo de corte del rna por la toxina bacteriana kid y de su actividad inhibidora de la traducci\u00f3n.<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Evaluaci\u00f3n del mecanismo de corte del rna por la toxina bacteriana kid y de su actividad inhibidora de la traducci\u00f3n. <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Elizabeth Diago Navarro <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Complutense de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 27\/11\/2009<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Ram\u00f3n D\u00edaz Oreja<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: cecilia Arraiano <\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Elizabeth Diago Navarro Null kid, la toxina del sistema de mantenimiento pard (kis, kid) del pl\u00e1smido r1, 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