{"id":98538,"date":"2010-12-01T00:00:00","date_gmt":"2010-12-01T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/analisis-comparativo-de-la-expresion-e-interferencia-genica-de-dos-acetilcolinesterasas-en-blattella-germanica-l-dyctioptera-blattellidae-y-en-leptinotarsa-decemlineata-say-coleoptera-chrysom\/"},"modified":"2010-12-01T00:00:00","modified_gmt":"2010-12-01T00:00:00","slug":"analisis-comparativo-de-la-expresion-e-interferencia-genica-de-dos-acetilcolinesterasas-en-blattella-germanica-l-dyctioptera-blattellidae-y-en-leptinotarsa-decemlineata-say-coleoptera-chrysom","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/entomologia\/analisis-comparativo-de-la-expresion-e-interferencia-genica-de-dos-acetilcolinesterasas-en-blattella-germanica-l-dyctioptera-blattellidae-y-en-leptinotarsa-decemlineata-say-coleoptera-chrysom\/","title":{"rendered":"An\u00e1lisis comparativo de la expresi\u00f3n e interferencia g\u00e9nica de dos acetilcolinesterasas en blattella germanica (l) (dyctioptera, blattellidae) y en leptinotarsa decemlineata (say) (coleoptera, chrysomelidae)"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Loic Revuelta Luis <\/strong><\/h2>\n<p>La acetilcolinesterasa (ache, ec 3.1.1.7) es una enzima esencial en las sinapsis colin\u00e9rgicas de todos los animales, incluyendo los insectos. La ache termina el impulso nervioso mediante la hidr\u00f3lisis r\u00e1pida del neurotransmisor acetilcolina en el espacio sin\u00e1ptico. En insectos, la ache ha sido estudiada principalmente en relaci\u00f3n con la resistencia a insecticidas, ya que esta enzima es diana de los insecticidas organofosforados y carbamatos y su insensibilidad es uno de los principales factores que conlleva resistencia. en insectos se ha descrito la existencia de dos genes (ace1 y ace2) que codifican dos subfamilias de acetilcolinesterasas (ache1 y ache2, respectivamente). Las evidencias obtenidas hasta la fecha indican que la mayor\u00eda de las especies de insectos poseen los dos genes, ace1 y ace2. La excepci\u00f3n se encuentra en las especies del grupo cyclorrhapha, entre las que se encuentra drosophila melanogaster, que posiblemente poseen un \u00fanico gen, ace2. Actualmente, se desconoce el sentido funcional de la existencia de dos aches. a pesar de las evidencias mencionadas, en el escarabajo de la patata, leptinotarsa decemlineata (say) (coleoptera: chrysomelidae), s\u00f3lo se conoce un gen ace, ldace2. En la presente tesis doctoral se describe la clonaci\u00f3n y la secuenciaci\u00f3n de un nuevo gen ace en l. Decemlineata (ldace1). Se ha estudiado la expresi\u00f3n de ambos genes ace, ldace1 y ldace2, en diferentes etapas de desarrollo de esta especie. Los niveles de expresi\u00f3n fueron siempre mayores para ldace1 en comparaci\u00f3n con ldace2. adem\u00e1s, se utiliz\u00f3 la t\u00e9cnica de interferencia por rna (rnai) para silenciar la expresi\u00f3n de ambos genes de l. Decemlineata y de blattella germanica (l.) (Dyctioptera: blattellidae) mediante la inyecci\u00f3n de rnas bicatenarios (dsrnas) espec\u00edficos. El objetivo fue valorar la contribuci\u00f3n de cada ache, ache1 y ache2, a la actividad ache total as\u00ed como su impacto en la supervivencia del insecto y en la sensibilidad a insecticidas. El silenciamiento de los tr\u00e1nscritos de los genes ace1 o ace2 fue cercano al 100%, siete d\u00edas despu\u00e9s de la inyecci\u00f3n. Tambi\u00e9n se observ\u00f3 una reducci\u00f3n de la actividad ache, aunque menos pronunciada, probablemente debido a la larga vida de esta enzima. La reducci\u00f3n en la actividad ache fue significativamemte superior en los insectos en los que se silenci\u00f3 la expresi\u00f3n de ace1 (46-49%, seg\u00fan la especie y el tejido) en relaci\u00f3n a los insectos en los que se interfiri\u00f3 ace2 (11-16%). Usando medidas espectrofotom\u00e9tricas y zimogramas, se obtuvieron evidencias de que ache1 representa el 65-75% de la actividad ache total en el tejido nervioso tanto de l. Decemlineata como en b. Germanica, demostr\u00e1ndose que el gen ace1 codifica una ache predominante. Es m\u00e1s, el silenciamiento de la expresi\u00f3n del gen ace1 pero no del gen ace2 en l. Decemlineata redujo significativamente la supervivencia del insecto, lo que remarca el papel fisiol\u00f3gico esencial de ldace1 en la vida de l. Decemlineta. Adem\u00e1s, en los insectos de las dos especies, l. Decemlineata y b. Germanica, en los que se silenci\u00f3 ace1 se observ\u00f3 un aumento significativo en la sensibilidad al insecticida organofosforado clorpirifos que no ocurri\u00f3 cuando se silenci\u00f3 el gen ace2. Tambi\u00e9n, el silenciamiento de la expresi\u00f3n del gen ace1, pero no del gen ace2, produjo un incremento de mortalidad frente al piretroide \u00c2\u00bf-cialotrina en b. Germanica. los resultados obtenidos en este trabajo aportan nuevos datos que sugieren que ache1 contribuye mayormente a la actividad ache y presenta una funci\u00f3n esencial, a nivel cualitativo y\/o cuantitativo, como diana de insecticidas en insectos. La funci\u00f3n de ache2 en la fisiolog\u00eda del sistema nervioso de insectos no pertencientes al grupo cyclorrhapha deber\u00e1 ser aclarada en estudios posteriores. este trabajo podr\u00e1 servir de base para el estudio del rnai como estrategia directa o complementaria con el uso de insecticidas, para el control de plagas mediante el silenciamiento de genes esenciales del insecto.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>An\u00e1lisis comparativo de la expresi\u00f3n e interferencia g\u00e9nica de dos acetilcolinesterasas en blattella germanica (l) (dyctioptera, blattellidae) y en leptinotarsa decemlineata (say) (coleoptera, chrysomelidae)<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 An\u00e1lisis comparativo de la expresi\u00f3n e interferencia g\u00e9nica de dos acetilcolinesterasas en blattella germanica (l) (dyctioptera, blattellidae) y en leptinotarsa decemlineata (say) (coleoptera, chrysomelidae) <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Loic Revuelta Luis <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Polit\u00e9cnica de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 12\/01\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Francisco Tenllado Peralo<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: isabel Diaz <\/li>\n<li>Mar\u00eda  dolors Piulachs baga (vocal)<\/li>\n<li>pablo Bielza lino (vocal)<\/li>\n<li>Juan  Antonio Garcia alvarez (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Loic Revuelta Luis La acetilcolinesterasa (ache, ec 3.1.1.7) es una enzima esencial en las sinapsis colin\u00e9rgicas de [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"default","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center 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