{"id":98631,"date":"2018-03-11T10:19:30","date_gmt":"2018-03-11T10:19:30","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/caracterizacion-y-cultivo-de-celulas-de-la-superficie-ocular-humana-obtenidas-mediante-tecnicas-no-invasivas\/"},"modified":"2018-03-11T10:19:30","modified_gmt":"2018-03-11T10:19:30","slug":"caracterizacion-y-cultivo-de-celulas-de-la-superficie-ocular-humana-obtenidas-mediante-tecnicas-no-invasivas","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/oftalmologia\/caracterizacion-y-cultivo-de-celulas-de-la-superficie-ocular-humana-obtenidas-mediante-tecnicas-no-invasivas\/","title":{"rendered":"Caracterizacion y cultivo de celulas de la superficie ocular humana obtenidas mediante tecnicas no invasivas"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Hernan Alfonso Martinez Osorio <\/strong><\/h2>\n<p>Objetivo. La presente tesis doctoral obtuvo, por m\u00e9todos m\u00ednimamente invasivos, el n\u00famero suficiente de c\u00e9lulas viables de la superficie ocular (espec\u00edficamente de la conjuntiva o mucosa ocular) como para poder llevarlas a un cultivo in vitro durante al menos 5 d\u00edas. El uso de m\u00e9todos m\u00ednimamente invasivos y las t\u00e9cnicas de cultivo celular permitir\u00e1 obtener un modelo in vitro para poder realizar ensayos de todo tipo (etiopatog\u00e9nicos, terap\u00e9uticos, etc) e, incluso, poder lograr una monocapa que pueda usarse como trasplante para reconstruir la superficie ocular da\u00f1ada (ceguera corneal). Hasta el momento, no existen publicaciones que demuestren haber conseguido este objetivo a nivel ocular, aunque si se ha realizado en otras mucosas. metodolog\u00eda. Se ensayaron diversos m\u00e9todos no invasivos (es decir, diferentes de la biopsia) de obtenci\u00f3n de c\u00e9lulas, de manera que puedan realizarse sin molestias y, por ello, de manera repetida a lo largo del tiempo (por ejemplo antes y despu\u00e9s de un determinado tratamiento) en un mismo paciente. Estos m\u00e9todos son b\u00e1sicamente las citolog\u00edas por impresi\u00f3n y por cepillado conjuntival. Se seleccion\u00f3 la citolog\u00eda por cepillado porque permiti\u00f3 recuperar el mayor n\u00famero de c\u00e9lulas con la mejor viabilidad posible. Posteriormente, se llevaron estas c\u00e9lulas a un cultivo in vitro, determinando el soporte celular (membrana amni\u00f3tica desepitelizada), el medio de cultivo (dmem\/f12 con fbs 10%) y los aditivos m\u00e1s adecuados (egf, hidrocortisona, toxina col\u00e9rica e insulina) para estimular la supervivencia e, incluso, la proliferaci\u00f3n celular. Como controles se utiliz\u00f3 la l\u00ednea celular epitelial de conjuntiva humana sana (ioba-nhc). Por \u00faltimo, se caracterizaron las poblaciones celulares obtenidas en suspensi\u00f3n mediante citometr\u00eda de flujo para poder seleccionar las de inter\u00e9s para cada ensayo. Tambi\u00e9n se caracterizaron por m\u00e9todos convencionales (microscop\u00eda \u00f3ptica, inmuno fluorescencia e inmuno histoqu\u00edmica) las suspensiones celulares adheridas mediante citocentrifugaci\u00f3n. utilidad y futuras aplicaciones prevista del proyecto. Si se obtuviera un n\u00famero y viabilidad suficiente de c\u00e9lulas que mantengan alguna capacidad proliferativa, se lograr\u00eda tener un cultivo primario de c\u00e9lulas de la superficie ocular de la enfermedad que se desee. Aunque en principio de plantea como fuente inicial la conjuntiva, se podr\u00eda pensar en un futuro, y vali\u00e9ndose de esta experiencia previa, en la c\u00f3rnea y en el limbo. Esto permitir\u00eda realizar ensayos para avanzar nuestro conocimiento sobre la fisiopatolog\u00eda de una determinada enfermedad. Asimismo, se dispondr\u00eda de un modelo muy adecuado para ensayar nuevos f\u00e1rmacos directamente sobre el epitelio enfermo. Y, por \u00faltimo, incluso se podr\u00edan utilizar monocapas de estas c\u00e9lulas para reconstruir superficie ocular da\u00f1ada, pues existen evidencias de que las c\u00e9lulas madre epiteliales conjuntivales se encuentren en diversas localizaciones anat\u00f3micas de la superficie conjuntival.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Caracterizacion y cultivo de celulas de la superficie ocular humana obtenidas mediante tecnicas no invasivas<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Caracterizacion y cultivo de celulas de la superficie ocular humana obtenidas mediante tecnicas no invasivas <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Hernan Alfonso Martinez Osorio <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Valladolid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 15\/01\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Yolanda Diebold  Luque<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: eduardo Arranz sanz <\/li>\n<li>Rafael Barraquer compte (vocal)<\/li>\n<li>Juan  Antonio Duran de la colina (vocal)<\/li>\n<li>Francisco Javier Iglesias mu\u00f1oz (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Hernan Alfonso Martinez Osorio Objetivo. 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