{"id":99195,"date":"2018-03-11T10:20:13","date_gmt":"2018-03-11T10:20:13","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/engineering-and-production-of-quality-viral-proteins-in-prokaryotic-and-eukaryotic-systems\/"},"modified":"2018-03-11T10:20:13","modified_gmt":"2018-03-11T10:20:13","slug":"engineering-and-production-of-quality-viral-proteins-in-prokaryotic-and-eukaryotic-systems","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/proteinas\/engineering-and-production-of-quality-viral-proteins-in-prokaryotic-and-eukaryotic-systems\/","title":{"rendered":"Engineering and production of quality viral proteins in prokaryotic and eukaryotic systems"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> M\u00f3nica Mart\u00ednez Alonso <\/strong><\/h2>\n<p>La posibilidad de obtener prote\u00ednas con aplicaciones industriales o terap\u00e9uticas mediante la tecnolog\u00eda del dna recombinante ha revolucionado la industria biotecnol\u00f3gica. A pesar de esto, la producci\u00f3n de prote\u00ednas recombinantes en sistemas heter\u00f3logos a\u00fan no est\u00e1 optimizada, y muchas veces estas prote\u00ednas se obtienen en forma insoluble. La selecci\u00f3n de un sistema de expresi\u00f3n adecuado es importante para conseguir obtener la prote\u00edna en una forma funcional y soluble. En esta tesis se ha utilizado una gfp recombinante como prote\u00edna modelo para estudiar agregaci\u00f3n y actividad durante la producci\u00f3n de prote\u00ednas recombinantes en escherichia coli y en el sistema de expresi\u00f3n de baculovirus. al producir nuestra prote\u00edna modelo en e. Coli, \u00e9sta se obtiene mayoritariamente en forma de cuerpos de inclusi\u00f3n con una elevada actividad biol\u00f3gica. Nuestros resultados indican que aunque es posible mejorar la solubilidad de la prote\u00edna optimizando par\u00e1metros del proceso de producci\u00f3n, las condiciones que permiten mejorar los niveles de producci\u00f3n resultan en una disminuci\u00f3n de la calidad conformacional de la prote\u00edna obtenida. Ya que no es posible maximizar al mismo tiempo el rendimiento del proceso de producci\u00f3n y la calidad de la prote\u00edna obtenida, el dise\u00f1o del proceso deber\u00e1 optimizarse en funci\u00f3n del par\u00e1metro m\u00e1s relevante para el uso final de la prote\u00edna. adem\u00e1s, la versi\u00f3n soluble de esta prote\u00edna contiene una amplia gama de agregados solubles, que conforman una poblaci\u00f3n heterog\u00e9nea en cuanto a estructura secundaria y funcionalidad. Esto indica que los cuerpos de inclusi\u00f3n, que son m\u00e1s homog\u00e9neos que su versi\u00f3n soluble, pueden entenderse como una peque\u00f1a subpoblaci\u00f3n dentro del total de especies proteicas recombinantes. Por otra parte, la calidad de la prote\u00edna recombinante representa un promedio estad\u00edstico de la calidad de cada una de estas especies. una de las estrategias m\u00e1s utilizadas para mejorar la solubilidad de prote\u00ednas recombinantes consiste en la coexpresi\u00f3n de moduladores del plegamiento. Al coexpresar la chaperona bacteriana dnak y su cochaperona dnaj con nuestra gfp modelo producida en e. Coli, observamos una disminuci\u00f3n de la agregaci\u00f3n, que estaba asociada a prote\u00f3lisis. El cambio de hu\u00e9sped de estas chaperonas juntamente con nuestra prote\u00edna modelo para producirlas en el sistema de expresi\u00f3n de baculovirus en c\u00e9lulas de insecto o larvas permiti\u00f3 mantener la actividad foldasa de dnakj eliminando su actividad proteol\u00edtica asociada, ya que \u00e9sta es dependiente de proteasas bacterianas. En el sistema de expresi\u00f3n de baculovirus observamos mejoras en los niveles de prote\u00edna total y soluble, la estabilidad proteol\u00edtica, solubilidad y actividad biol\u00f3gica al ser coexpresada con las chaperonas bacterianas dnakj. Adem\u00e1s, hemos podido confirmar en un sistema eucariota el concepto de que el rendimiento y la calidad de la prote\u00edna obtenida son par\u00e1metros antag\u00f3nicos que no se pueden favorecer de forma simult\u00e1nea en procesos de producci\u00f3n. por \u00faltimo, tambi\u00e9n hemos podido comprobar que las chaperonas bacterianas son funcionales en un sistema eucariota. Esto permite ampliar el cat\u00e1logo de moduladores del plegamiento disponibles para su uso en sistemas eucariotas.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Engineering and production of quality viral proteins in prokaryotic and eukaryotic systems<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Engineering and production of quality viral proteins in prokaryotic and eukaryotic systems <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 M\u00f3nica Mart\u00ednez Alonso <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Aut\u00f3noma de barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 16\/02\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Antonio Villaverde Corrales<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: montserrat Llagostera casas <\/li>\n<li>Mar\u00eda  Luisa Tutino (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de M\u00f3nica Mart\u00ednez Alonso La posibilidad de obtener prote\u00ednas con aplicaciones industriales o terap\u00e9uticas mediante la tecnolog\u00eda del 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