{"id":99290,"date":"2018-03-11T10:20:22","date_gmt":"2018-03-11T10:20:22","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/estabilizacion-de-enzimas-proteola%c2%adticos-para-aplicacion-ocular-y-otica\/"},"modified":"2018-03-11T10:20:22","modified_gmt":"2018-03-11T10:20:22","slug":"estabilizacion-de-enzimas-proteola%c2%adticos-para-aplicacion-ocular-y-otica","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/barcelona\/estabilizacion-de-enzimas-proteola%c2%adticos-para-aplicacion-ocular-y-otica\/","title":{"rendered":"Estabilizaci\u00f3n de enzimas proteol\u00edticos para aplicaci\u00f3n ocular y \u00f3tica"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> N\u00faria Jim\u00e9nez Ridruejo <\/strong><\/h2>\n<p>Las complicaciones relacionadas con el uso de las lentes de contacto pueden poner en peligro la visi\u00f3n. La m\u00e1s com\u00fan es la formaci\u00f3n de dep\u00f3sitos de prote\u00ednas en las lentes de contacto blandas pudiendo causar conjuntivitis papilar gigantina. Por otro lado, se dan patolog\u00edas oculares relacionadas con el uso de las lentes como, da\u00f1o metab\u00f3lico epitelial y conjuntivitis t\u00f3xica (1). Para prevenir dichas complicaciones es necesaria una adecuada prevenci\u00f3n. Para ello, se utilizan agentes de limpieza, sistemas desinfectantes y conservantes, soluciones de aclarado y almacenamiento, lubricantes y humectantes. Los limpiadores enzim\u00e1ticos como la papa\u00edna (digiere prote\u00ednas) y la pancreatina (digiere prote\u00ednas, l\u00edpidos y mucina) (2) pueden provocar conjuntivitis t\u00f3xica si no se eliminan adecuadamente de la superficie de las lentes despu\u00e9s de la limpieza.   los enzimas son inestables en medio acuoso debido a la gran variedad de grupos funcionales presentes en su estructura, susceptibles de una serie de reacciones qu\u00edmicas intra e intermoleculares(3). Esto puede conllevar un cambio en la conformaci\u00f3n nativa de las prote\u00ednas de forma irreversible y consecuentemente una p\u00e9rdida de la actividad proteol\u00edtica(4) y por lo tanto una disminuci\u00f3n de la eficacia como limpiadores enzim\u00e1ticos.  la tripsina es una proteasa pancre\u00e1tica utilizada para la limpieza de lentes de contacto. El residuo aspartato presente en la tripsina act\u00faa selectivamente sobre los residuos lisina y arginina de otros sustratos (que se pueden encontrar en las lentes de contacto) y sobre ella misma provocando una autolisis y una p\u00e9rdida de actividad (5). Por metilaci\u00f3n reductiva de los residuos lisina de la tripsina convirtiendo los grupos amino en dimetilamino se desarroll\u00f3 la metil tripsina. Este enzima act\u00faa selectivamente sobre los mismos residuos que la tripsina pero es m\u00e1s estable, m\u00e1s resistente a la autolisis. Adem\u00e1s, la metil tripsina tiene mejor perfil de seguridad a nivel ocular, con menos efectos secundarios y no es sensibilizante.   dado que cantidades muy bajas de enzima proteol\u00edtico (<20 au\/ml) son eficaces como limpiadores enzim\u00e1ticos, se pens\u00f3 en desarrollar un sistema nanoparticular que proporcione estabilidad al enzima, con una cesi\u00f3n lenta de \u00e9ste manteniendo su eficacia y evitando las complicaciones secundarias atribuidas a una deficitaria prevenci\u00f3n.   demostrada la eficacia de los enzimas proteol\u00edticos para digerir las prote\u00ednas en las lentes de contacto (6), y conociendo la necesidad de nuevos productos eficaces para deshacer la cera del o\u00eddo se pens\u00f3 en desarrollar un producto cerumenol\u00edtico que contenga enzimas proteol\u00edticos. El cerumen est\u00e1 compuesto mayormente por l\u00e1minas descamadas de corneocitos originadas en el canal auditivo interno y superficial mezclado con secreciones glandulares(7). Las gl\u00e1ndulas seb\u00e1ceas y ceruminosas en el canal auditivo secretan l\u00edpidos y p\u00e9ptidos, respectivamente en el cerumen.  el objetivo de este trabajo de investigaci\u00f3n es estudiar la estabilizaci\u00f3n del enzima proteol\u00edtico metil tripsina para su posible uso como limpiador enzim\u00e1tico de lentes de contacto y como cerumenol\u00edtico. Se han seguido dos l\u00edneas de estabilizaci\u00f3n, la primera consiste en el desarrollo de una f\u00f3rmula extempor\u00e1nea que contiene en el mismo envase separadamente el enzima en soluci\u00f3n o bien en granulado y por otro lado una soluci\u00f3n con un tensioactivo y un conservador. Aunque el enzima est\u00e9 en soluci\u00f3n o bien en granulado, una vez reconstituido el producto, la composici\u00f3n de la f\u00f3rmula es la misma. El granulado representa una mejora en la estabilidad de la f\u00f3rmula respecto a la soluci\u00f3n. La otra l\u00ednea de estabilizaci\u00f3n es la formaci\u00f3n de nanopart\u00edculas de metil tripsina y el pol\u00edmero biodegradable, poly(d,l-lactico-co-glic\u00f3lico) (plga).  bibliograf\u00eda  1.\tBasic and clinical science course (1996-1997) section 3. Optics, refraction and contact lenses. American academy of ophthalmology. 278-279. 2.\tBasic and clinical science course (1996-1997) section 8. External disease and cornea. American academy of ophthalmology. 188-192. 3.\tCostantino hr, langer r, klibanov am. 1994. Solid-phase aggregation of proteins under pharmaceutically relevant conditions. J. Pharm. Sciences. 83:1662-1669. 4.\tWinters ma, debenedetti pg, carey j, sparks hg, sane su, przybycien tm. 1997. Long-term and high-temperature storage of supercritically-processed microparticulate protein powders. Pharm. Research. 14:1370-1378. 5.\tDulay mt, baca qj, zare rn. 2005. Enhanced proteolytic activity of covalently bound enzymes in photopolymerized sol gel. Anal. Chem. 77: 4604-4610. 6.\tAsgharian b, hong bs. 2001. Liquid enzyme compositions and methods of use in contact lens cleaning and disinfecting systems. Patent number: us 6,214,596b1. 7.\tRobinson ac, hawke m, mackay a, ekem jk, stratis m. 1989. The mechanism of cerumenolysis. J. Otolaringol., 18:268-273.\n\n\n\n&nbsp;\n\n\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Estabilizaci\u00f3n de enzimas proteol\u00edticos para aplicaci\u00f3n ocular y \u00f3tica<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Estabilizaci\u00f3n de enzimas proteol\u00edticos para aplicaci\u00f3n ocular y \u00f3tica <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 N\u00faria Jim\u00e9nez Ridruejo <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 19\/02\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Mar\u00eda  Luisa Garcia L\u00f3pez<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: oriol Valls planells <\/li>\n<li>Jos\u00e9 ram\u00f3n L\u00f3pez esquerdo (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de N\u00faria Jim\u00e9nez Ridruejo Las complicaciones relacionadas con el uso de las lentes de contacto pueden poner en 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