{"id":99371,"date":"2018-03-11T10:20:27","date_gmt":"2018-03-11T10:20:27","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/estudio-de-gins-un-nuevo-complejo-vitaminico-esencial-para-la-replicacion-del-genoma-humano\/"},"modified":"2018-03-11T10:20:27","modified_gmt":"2018-03-11T10:20:27","slug":"estudio-de-gins-un-nuevo-complejo-vitaminico-esencial-para-la-replicacion-del-genoma-humano","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/biologia-molecular\/estudio-de-gins-un-nuevo-complejo-vitaminico-esencial-para-la-replicacion-del-genoma-humano\/","title":{"rendered":"Estudio de gins, un nuevo complejo vitaminico esencial para la replicacion del genoma humano"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Tomas Aparicio Casado <\/strong><\/h2>\n<p>Gins es un complejo heterotetram\u00e9trico conservado evolutivamente en los organismos eucariotas, formado por las prote\u00ednas sld5 (synthetic lethal with dpb 11-5), psf1, psf2 y psf3 (partnerse os sld five-1, 2, 3). Fue inicialmente descrito en levaduras como un complejo esencial para el proceso de replicaci\u00f3n del adn. La presente memoria de tesis doctoral se centra en la caracterizaci\u00f3n del ort\u00f3logo humano del complejo gins y en su papel en la replicaci\u00f3n del adn en c\u00e9lulas humanas.  en primer lugar procedimo a la clonaci\u00f3n de las cuatro subunidades y a la expresi\u00f3n y purificaci\u00f3n y del complejo recombinante en el sistema bacteriano de e.Coli. Utilizando como ant\u00edgeno la prote\u00edna purificada, se prepararon anticuerpos espec\u00edficos contra cada una de sus subunidades.  la purificaci\u00f3n del complejo permiti\u00f3 la realizaci\u00f3n de ensayos de retraso de movilidad electrofor\u00e9tica que indicaron la capacidad de hgins de interaccionar con mol\u00e9culas de adn, mostrando preferencia por sustratos de cadena sencilla. Asimismo, en colaboraci\u00f3n con el grupo de cristalograf\u00eda de macromol\u00e9culas, dirigido por el dr. Guillermo montoya se realiz\u00f3 un estudio estructural mediante la combinaci\u00f3n de microscop\u00eda electr\u00f3nica y espectrometr\u00eda de masas que revel\u00f3 la arquitectura del complejo. De acuerdo con nuestro estudio las subunidades de hgins estar\u00edan dispuesas en forma de c dejando una cavidad central en la cual podr\u00eda acomodarse una mol\u00e9cula de adn de cadena sencilla o incluso de cadena doble.  la obtenci\u00f3n de anticuerpos policlonales y monoclonales permiti\u00f3 realizar una caracterizaci\u00f3n del complejo gins en c\u00e9lulas humanas en cultivo. Gins es expresado en c\u00e9lulas en proliferaci\u00f3n y sus niveles son constantes a lo largo del ciclo celular. En c\u00e9lulas quiescentes la expresi\u00f3n de gins cesa y sus niveles se reducen r\u00e1pidamente sugiriendo que se trata de un factor asociado a la proliferaci\u00f3n celular activa. La depleci\u00f3n de gins en c\u00e9lulas hela mediante rna interferente provoca la acumulaci\u00f3n de c\u00e9lulas en la transici\u00f3n de la fase g1 a s, la acumulaci\u00f3n de da\u00f1o en adn y la activaci\u00f3n del mecanismo checkpoint mediado por la prote\u00edna kinasa chk1.  mediante ensayo de inmunoprecipitaci\u00f3n en extractos de fracciones enriquecidas en cromatina, se pudo demostrar la interacci\u00f3n de gins, mcm2-7 y cdc45 indicando la existencia de un complejo ternario cdc45:mcm2-7:gins (cmg) en c\u00e9lulas humanas, propuesto como helicasa replicativa.  por \u00faltimo presentamos un estudio acerca de la localizaci\u00f3n de gins y mcms en el n\u00facleo de c\u00e9lulas humanas durante el proceso de replicaci\u00f3n de adn y proponemos un modelo que explica la denominada paradoja de las mcms.  en conjunto los resultados de esta tesis a\u00f1aden m\u00e1s conocimiento al estudio del papel de las prote\u00ednas gins y mcm2-7 en el proceso de la replicaci\u00f3n del adn en c\u00e9lulas humanas.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Estudio de gins, un nuevo complejo vitaminico esencial para la replicacion del genoma humano<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Estudio de gins, un nuevo complejo vitaminico esencial para la replicacion del genoma humano <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Tomas Aparicio Casado <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Aut\u00f3noma de Madrid<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 24\/02\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Juan M\u00e9ndez Zunzunegui<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: Luis Blanco d\u00e1vila <\/li>\n<li>ramon Campos olivas (vocal)<\/li>\n<li>Antonio Bernad miana (vocal)<\/li>\n<li>david Garc\u00eda quintana (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Tomas Aparicio Casado Gins es un complejo heterotetram\u00e9trico conservado evolutivamente en los organismos eucariotas, formado por las 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