{"id":99644,"date":"2010-10-03T00:00:00","date_gmt":"2010-10-03T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/sin-categoria\/protea%c2%afnes-daescherichia-coli-implicades-en-el-dia-leg-amb-laentera%c2%b2cit-caracteritzacio-del-regulador-transcripcional-lldr-i-de-la-gliceraldehid-3-fosfat-deshidrogenasa-ex\/"},"modified":"2010-10-03T00:00:00","modified_gmt":"2010-10-03T00:00:00","slug":"protea%c2%afnes-daescherichia-coli-implicades-en-el-dia-leg-amb-laentera%c2%b2cit-caracteritzacio-del-regulador-transcripcional-lldr-i-de-la-gliceraldehid-3-fosfat-deshidrogenasa-ex","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.deberes.net\/tesis\/bioquimica-molecular\/protea%c2%afnes-daescherichia-coli-implicades-en-el-dia-leg-amb-laentera%c2%b2cit-caracteritzacio-del-regulador-transcripcional-lldr-i-de-la-gliceraldehid-3-fosfat-deshidrogenasa-ex\/","title":{"rendered":"Prote\u00c1\u00afnes d\u00c2\u00bfescherichia coli  implicades en el di\u00c1\u00a0leg amb l\u00c2\u00bfenter\u00f3cit: caracteritzaci\u00f3 del regulador transcripcional lldr i de la gliceraldehid-3-fosfat deshidrogenasa extracel.lular"},"content":{"rendered":"<h2>Tesis doctoral de <strong> Mar\u00eda  Laura Aguilera Gil <\/strong><\/h2>\n<p>El tracto gastrointestinal del individuo humano se encuentra colonizado por una gran variedad de microorganismos que conforman la microbiota intestinal. El epitelio intestinal representa la superficie donde el hu\u00e9sped puede interaccionar con la bacteria. Independientemente de si el balance final de esta interacci\u00f3n es positivo o negativo, la gran presi\u00f3n selectiva que tiene lugar en la interfase bacteria-hu\u00e9sped determina que ambas partes hayan desarrollado m\u00faltiples maneras de comunicarse entre ellas. en este trabajo se han abordado dos aspectos relacionados con la interacci\u00f3n bacteria-hu\u00e9sped. Por un lado, como modelo de adaptaci\u00f3n metab\u00f3lica durante la adhesi\u00f3n de escherichia coli a enterocitos, se ha estudiado la regulaci\u00f3n del oper\u00f3n lldprd. Por otra parte, se ha profundizado en el estudio de los mecanismos de secreci\u00f3n de la prote\u00edna multifuncional gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa (gapdh) de cepas pat\u00f3genas y probi\u00f3ticas como mecanismo que la bacteria usa para interaccionar con el hu\u00e9sped. en referencia a la adaptaci\u00f3n metab\u00f3lica de e. Coli durante la adhesi\u00f3n, se ha seleccionado el gen lldr, que se encuentra sobreexpresado en e. Coli enterohemorr\u00e1gica (ehec) adherida a c\u00e9lulas caco-2 en cultivo, como representante de los genes implicados en el metabolismo general que pueden estar implicado en la adaptaci\u00f3n de la bacteria al h\u00e1bitat intestinal. Lldr codifica la prote\u00edna reguladora del oper\u00f3n lldprd, responsable del metabolismo de l-lactato en e. Coli. En este estudio se ha asignado a lldr un papel dual como activador de la transcripci\u00f3n en presencia de l-lactato en el medio, y como represor en ausencia de \u00e9ste, a trav\u00e9s de la formaci\u00f3n de un bucle de dna formado mediante la uni\u00f3n de lldr a dos secuencias operadoras, que impide la transcripci\u00f3n. El hecho de que el oper\u00f3n lldprd se encuentre sobreexpresado en bacterias adheridas podr\u00eda representar un mecanismo por el cual la bacteria se adapta al aumento local de la concentraci\u00f3n de l-lactato en la superficie intestinal debido al metabolismo de la glucosa por parte del enterocito, contribuyendo al establecimiento de una relaci\u00f3n entre la enterobacteria y la c\u00e9lula hu\u00e9sped. en cuanto a los mecanismos de secreci\u00f3n e interacci\u00f3n de la gapdh bacteriana con el hu\u00e9sped, previamente ya se hab\u00eda identificado esta prote\u00edna como prote\u00edna secretada por cepas pat\u00f3genas ehec i epec (e. Coli enteropat\u00f3gena). En el presente estudio se ha determinado la participaci\u00f3n de dos mecanismos de secreci\u00f3n alternativos, el de tipo inyectisoma (t3ass), activo en cepas pat\u00f3genas en medio de cultivo eucariota, y otro mecanismo a\u00fan por identificar, activo en cepas pat\u00f3genas y probi\u00f3ticas (e. Coli nissle 1917) en medio de cultivo bacteriol\u00f3gico lb. No se detecta secreci\u00f3n de gapdh en cepas aisladas naturales no pat\u00f3genas como la cepa ecor26, indicando que la secreci\u00f3n o exposici\u00f3n de la prote\u00edna en la superficie representa una ventaja para las bacterias pat\u00f3genas y probi\u00f3ticas en t\u00e9rminos de adhesi\u00f3n y colonizaci\u00f3n. As\u00ed por ejemplo, se ha determinado la capacidad de uni\u00f3n de gapdh a fibrin\u00f3geno y plasmin\u00f3geno. Este tipo de interacciones se consideran un mecanismo para facilitar la adhesi\u00f3n al hu\u00e9sped, a trav\u00e9s de la activaci\u00f3n del plasmin\u00f3geno y degradaci\u00f3n de la matriz extracelular. Adem\u00e1s, en una primera aproximaci\u00f3n para identificar prote\u00ednas citoplasm\u00e1ticas del hu\u00e9sped que interaccionen con gapdh, se abordaron experimentos de pull-down en los que se ha observado la interacci\u00f3n de gapdh con los factores de elongaci\u00f3n de la traducci\u00f3n eucari\u00f3ticos ef1by  y ef1b\u00c2\u00bf. Finalmente, y vinculado a la multifuncionalidad de la gapdh, en este estudio se ha comprobado la capacidad de la prote\u00edna gapdh de ser adp-ribosilada. Las modificaciones post-traduccionales de la gapdh se relacionan con sus diferentes funciones y localizaciones subcelulares. La gapdh tambi\u00e9n tiene actividad adp-ribosiltransferasa, hecho que podr\u00eda determinar su participaci\u00f3n en la modificaci\u00f3n de prote\u00ednas del hu\u00e9sped en el caso de ser translocada al citoplasma de la c\u00e9lula eucariota. en el contexto del di\u00e1logo entre la bacteria y el hu\u00e9sped colonizado, los resultados de este trabajo ayudan a entender algunos de los mecanismos por los que las cepas de e. Coli pat\u00f3genas y probi\u00f3ticas se adaptan al entorno intestinal y se adhieren al epitelio m\u00e1s eficazmente que las bacterias que no presentan estos mecanismos.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Datos acad\u00e9micos de la tesis doctoral \u00ab<strong>Prote\u00c1\u00afnes d\u00c2\u00bfescherichia coli  implicades en el di\u00c1\u00a0leg amb l\u00c2\u00bfenter\u00f3cit: caracteritzaci\u00f3 del regulador transcripcional lldr i de la gliceraldehid-3-fosfat deshidrogenasa extracel.lular<\/strong>\u00ab<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>T\u00edtulo de la tesis:<\/strong>\u00a0 Prote\u00c1\u00afnes d\u00c2\u00bfescherichia coli  implicades en el di\u00c1\u00a0leg amb l\u00c2\u00bfenter\u00f3cit: caracteritzaci\u00f3 del regulador transcripcional lldr i de la gliceraldehid-3-fosfat deshidrogenasa extracel.lular <\/li>\n<li><strong>Autor:<\/strong>\u00a0 Mar\u00eda  Laura Aguilera Gil <\/li>\n<li><strong>Universidad:<\/strong>\u00a0 Barcelona<\/li>\n<li><strong>Fecha de lectura de la tesis:<\/strong>\u00a0 10\/03\/2010<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h3>Direcci\u00f3n y tribunal<\/h3>\n<ul>\n<li><strong>Director de la tesis<\/strong>\n<ul>\n<li>Josefa Badia Palacin<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<li><strong>Tribunal<\/strong>\n<ul>\n<li>Presidente del tribunal: josep Casadesus pursals <\/li>\n<li>Carlos Balsalobre parra (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<li>  (vocal)<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Tesis doctoral de Mar\u00eda Laura Aguilera Gil El tracto gastrointestinal del individuo humano se encuentra colonizado por una gran variedad 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