Tesis doctoral de Javier Regidor Cerrillo
El objetivo fundamental de este trabajo es la expresión funcional de receptores del sistema nervioso central en un sistema heterólogo como son las levaduras. Se trata de intentar acoplar funcionalmente el receptor metabotrópico de l-glutamato de rata (mglur1) a un sistema de la levadura s. Pombe cuantificable, y en concreto a la carcada de apareamiento, debido a la gran semejanza estructural y funcional de dicho receptor con los receptores de feromonas de levaduras. Esta estrategia perimitiría el estudio de su interacción con ligandos agonistas y antagonistas, el análisis molecular de los mismos y finalmente, la búsqueda y detección de nuevas moléculas farmacológicamente activas. el receptor mglur1a fue expresado en una cepa heterotálica de la levadura schizosaccharomyces pombe. El análisis de expresión de rna permitió comprobar el alto nivel de la transcripción del receptor, así como se comprobó alto grado de expresión de la proteina y su correcta localización en la membrana plasmática. Pero, a pesar de estos datos alentadores y de usar un sistema de detección-cuantificación específico y altamente eficiente, desarrollado en esta memdoria para la detección de la activación de la cascada de apareamiento, los resultados obtenidos fueron negativos. el desarrollo de proteínas de fusión del receptor mglur1a con la subunidad ga de s. Pombe y una subunidad quimérica de la subunidad ga. De s. Pombre y ga0 de x. Laevis, no mejoraron los resultados. Si bien, el desarrollo de proteínas similares basadas en el receptor mam2+ de s. Pombe (de la ruta de feromonas) y estas subunidades ga, revelaron datos significativos para comprender el mecanismo de iteneracción entre receptores y proteínas g y la realización de posteriores estudios de expresión heteróloga análogos a los efectuados. los estudios de unión a ligando radiactivo de los transformantes y de otros estudios de electroforesis de proteínas desvelaron que
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudio de la expresión del receptor mglur1a del sistema nervioso central de rattus novergicus en la levadura shizosaccharomyces pombe y líneas celulares de mamíferos.«
- Título de la tesis: Estudio de la expresión del receptor mglur1a del sistema nervioso central de rattus novergicus en la levadura shizosaccharomyces pombe y líneas celulares de mamíferos.
- Autor: Javier Regidor Cerrillo
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 30/05/2001
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- César Nombela Cano
- Tribunal
- Presidente del tribunal: José Martínez Peinado
- De Felipe Oroquieta Javier (vocal)
- Jaime Correa Bordes (vocal)
- Jesús Ezquerra Carrera (vocal)