Valoracion in vivo, mediante el ensayo cometa, del daño y reparacion del dna, en tejidos solidos

Tesis doctoral de M.pilar Carrera Agudo

Durante años se han empleado diversas tecnicas citogeneticas para valorar el daño en el dna producido por los agentes quimicos y fisicos. Una de las tecnicas más novedosas es la denominada ensayo cometa o electroforesis de nucleos aislados en microgeles de agarosa. esta metodología fue descrita por primera vez por singh en 1988 y consiste en estudiar el daño genomico en nucleos interfasicos. en esta tesis se ha valorado la radiación ionizante (rayos y) y los agentes alquilantes (etil-metan-sulfonato-ems) como fuentes de daño de origen fisico y quimico, respectivamente, en condiciones in vivo, comparando material animal (mus musculus) y vegetal (allium cepa), y utilizando tejido sólido en ambos casos. los objetivos propuestos en el desarrollo de esta tesis han sido, por una parte, la puesta a punto de la tecnica para tejido solido procedente de ambos organismos. En segundo lugar, el estudio in vivo en material animal del efecto de la radiacion y en dos tipos celulares procedentes de distinto tejido (tejido hepatico y sangre circulante) y por ultimo la valoracion en material vegetal del efecto de la radiacion ionizante y los agentes alquilantes, y valorando el efecto del post-tratamiento con cafeina como agente antirreparador. los resultados indican que los hepatocitos son más sensibles al daño por radiación y que los leucocitos. Paralelamente, en material vegetal, los núcleos manifiestan mas daño con radiación y que con ems. por otra parte, el post-tratamiento con cafeina confirma la acción antirreparadora que tiene, especialmente con el ems, y la caracteristica de poner de manifiesto un daño que aparentemente no existe. desde el punto de vista práctico, el ensayo cometa está siendo aplicado en numerosos campos de la biología, ensayos clinicos y genotoxicidad,en general, lo que la convierte en una tecnica muy valiosa.

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Valoracion in vivo, mediante el ensayo cometa, del daño y reparacion del dna, en tejidos solidos«

  • Título de la tesis:  Valoracion in vivo, mediante el ensayo cometa, del daño y reparacion del dna, en tejidos solidos
  • Autor:  M.pilar Carrera Agudo
  • Universidad:  Autónoma de Madrid
  • Fecha de lectura de la tesis:  20/10/2000

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Matilde Hernandez Navarrete
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: felipe (secretario) Cortes benavides
    • De la torre garcia-quintana consuelo (vocal)
    • nicolas Jouve de la barreda (vocal)
    • (vocal)

 

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