Caracterización de los genes de blakeslea trispora implicados en la biosíntesis de b-caroteno

Tesis doctoral de Begoña Paz Gonzalez

Los objetivos propuestos al inicio de este trabajo de investigación fueron los siguientes: 1. Desarrollo de un programa de selección clásica basado en mutación al azar. 2. Clonación de genes de b. Trispora implicados en la biosíntesis de -caroteno, y/o que presenten una expresión constitutiva. 3. Desarrollo de un protocolo de transformación de b. Trispora. 4. Expresión de genes biosintéticos de -caroteno en m. Circinelloides y b. Trispora. 5. Efecto de la luz sobre la producción de carotenoides en m. Circinelloides y b. Trispora. se han identificado, clonado y caracterizado los genes acta, carb y carra. El orf del gen acta (1.561 pb) posee 4 intrones, codifica una g-actina, y su región promotora es funcional en e. Coli y a. Chrysogenum. Los genes carb y carra se encuentran ligados en una región de 4,5 kb del genoma de b. Trispora, y se transcriben en sentidos opuestos bajo el control de un promotor bidireccional de 611 pb. El orf del gen carb (1.955 pb) posee 2 intrones y codifica una proteína con actividad fitoeno deshidrogenasa. El orf del gen carra (1.894 pb) posee 1 intrón y codifica una proteína con actividad fitoeno sintasa/licopeno ciclasa. el gen carb de la cepa superproductora de ?-Caroteno b. Trispora f-744 posee la mutación a1791c, que origina la sustitución del aminoácido ser presente en b. Trispora nrrl 2457 en la posición 528 por arg presente en f-744 (s528r). El gen carra de la cepa f-744 posee la mutación t497c que origina la sustitución del aminoácido pro presente en nrrl 2457 en la posición 143 por ser presente en f-744 (p143s)). los genes carb y carra de b. Trispora son funcionales en m. Circinelloides. El gen carb de b. Trispora complementa la deficiencia en la actividad fitoeno deshidrogenasa de la cepa m. Circinelloides ms23, y el gen carra complementa la deficiencia en las actividades fitoeno sintasa y licopeno ciclasa de la cepa m. Circinelloides ms8. La expresión del gen carra de b. Trispora en m. Circi

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización de los genes de blakeslea trispora implicados en la biosíntesis de b-caroteno«

  • Título de la tesis:  Caracterización de los genes de blakeslea trispora implicados en la biosíntesis de b-caroteno
  • Autor:  Begoña Paz Gonzalez
  • Universidad:  León
  • Fecha de lectura de la tesis:  14/07/2006

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • José Luis Barredo Fuente
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: Jesús manuel Cantoral fernández
    • Javier Velasco alvarez (vocal)
    • Mellado duran (vocal)
    • bruno Díez García (vocal)

 

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