Tesis doctoral de Cima Martin Sergio De
Phycomyces blakesleeanus es un hongo filamentoso capaz de crecer en acetato, para lo cual necesita la enzima acetil-coa sintetasa (acs1), codificada por el gen faca, que es inducido por acetato y reprimido por glucosa. Hemos detectado en situaciones de estrés por ausencia de fuente de carbono la existencia de una segunda acetil-coa sintetasa (acs2), que no es codificada por el gen faca y no contribuye al crecimiento del organismo en acetato. Ambas acs han sido purificadas y caracterizadas, siendo sus propiedades cinéticas similares entre ellas. Las dos enzimas pueden activar propionato además de acetato, muestran una cinética de saturación hiperbólica con respecto a acetato, propionato, coenzima a y atp, y tienen un ph óptimo en torno a 8,0. Ninguno de los metabolitos intermediarios estudiados tuvo algún efecto inhíbidor o activador sobre ninguna de las dos enzimas. Por otro lado, la inhibición por nem y anhídrido succínico sugiere la participación de al menos un residuo de cisteína y un residuo de lisina en el centro activo y/o en el mantenimiento de la estructura nativa de ambas enzimas. La diferencia más notable encontrada entre ambas enzimas es su diferente temperatura óptima: 30ºc para acs1 y 50ºc para acs2, temperatura esta última muy superior a la temperatura de crecimiento del hongo. También la estabilidad frente a temperatura, ph, urea y digestión por tripsina es mayor en acs2 que en acs1, lo que apoya la teoría de que acs2 tiene una mayor rigidez conformacional y pueda ser considerada una proteína de estrés.
Datos académicos de la tesis doctoral «Metabolismo del acetato en phycomyces blakesleeanus. purificación y caracterización de dos acetil-coa sintetasas«
- Título de la tesis: Metabolismo del acetato en phycomyces blakesleeanus. purificación y caracterización de dos acetil-coa sintetasas
- Autor: Cima Martin Sergio De
- Universidad: León
- Fecha de lectura de la tesis: 24/05/2006
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Mª Dolores Arriaga Giner
- Tribunal
- Presidente del tribunal: angel Reglero chillon
- Juan José Aragón reyes (vocal)
- Fernando Moreno sanz (vocal)
- mercedes Renobales scheifler (vocal)
